治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物及其制法和检测方法

1.一种治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物，其特征在于按照重量份计，制成该中药组合物有效组分的原料为：人参190-310、石菖蒲190-310、川芎190-310、银杏叶
190-310、熟地225-375、远志110-190。
2.如权利要求1所述的治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物，其特征在于按照重量份计，制成该组合物有效成分的原料为：人参220-280、石菖蒲220-280、川芎220-280、银杏叶220-280、熟地260-340、远志130-170。
3.如权利要求2所述的治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物，其特征在于按照重量份计，制成该组合物有效成分的原料为：人参250、石菖蒲250、川芎250、银杏叶250、熟地
300、远志150。
4.如权利要求1、2或3所述的治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物，其特征在于所述中药组合物为丸剂、颗粒剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、片剂或口服液体制剂。
5.如权利要求4所述的治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物，其特征在于所述中药组合物为口服液。
6.如权利要求5所述的治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物的口服液，其特征在于它是通过以下方法制备的：人参250g、石菖蒲250g、川芎250g、银杏叶250g、熟地300g、远志150g；川芎、石菖蒲加10倍量水蒸馏6小时，提取挥发油备用，残留液另器收集；人参、银杏叶、熟地、远志加10倍量水煎煮三次，每次1.5小时，合并滤液及上述残留液，滤过，减压浓缩至20℃相对密度为1.08-1.10，加乙醇使含醇量达50％，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至20℃相对密度为1.06，静置24小时，取上清液滤过，滤液加入上述挥发油、适量增溶剂、矫味剂、防腐剂，调整体积至1000ml，滤过，分装，灭菌，即得。
7.如权利要求1-5任一权利要求所述的治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物的制备方法，其特征在于：川芎、石菖蒲两味蒸馏提取挥发油；人参、银杏叶、熟地、远志进行水煎；加适宜辅料，制成制剂。
8.如权利要求7所述的治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物的制备方法，其特征在于：川芎、石菖蒲加8-12倍量水蒸馏2-9小时，提取挥发油备用或包合干燥，残留液另器收集；人参、银杏叶、熟地、远志加8-12倍量水煎煮1-3次，每次1-2小时，合并滤液及上述残留液，滤过，减压浓缩至20℃相对密度为1.00-1.20，加乙醇使含醇量达40-70％，静置8-30小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至20℃相对密度为1.00-1.10，静置12-30小时，取上清液滤过或浓缩干燥、加入挥发油及适宜辅料，制成制剂。
9.如权利要求7或8所述的治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物的制备方法，其特征在于：川芎、石菖蒲加10倍量水蒸馏6小时，提取挥发油备用，残留液另器收集；人参、银杏叶、熟地、远志加10倍量水煎煮三次，每次1.5小时，合并滤液及上述残留液，滤过，减压浓缩至20℃相对密度为1.08-1.10，加乙醇使含醇量达50％，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至20℃相对密度为1.06，静置24小时，取上清液滤过，滤液加入上述挥发油、适量增溶剂、矫味剂、防腐剂，滤过，分装，灭菌，即得口服液。
10.如权利要求6所述的治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物的口服液的鉴别方法，其特征在于该方法包括如下方法的一种或几种：
(1)石菖蒲的薄层鉴别：取本发明8ml，用乙醚萃取2次，每次20ml，分取乙醚层，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml，使溶解，作为供试品溶液；另取石菖蒲对照药材2g，加乙醚25ml，超声处理10min，过滤，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml，使溶解，作为对照药材溶液；照《中国药典》薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各5μl，分别点于同一含0.5％CMC-Na溶液为粘合剂的硅胶G薄层板上，以60-90℃的石油醚-醋酸乙酯＝8∶2为展开剂，展开，展距8cm，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点，再以碘蒸气熏至斑点显色清晰，日光下检视，显相同的棕褐色斑点；
(2)川芎的薄层鉴别：取本发明8ml，用乙醚萃取2次，每次20ml，分取乙醚层，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml，使溶解，作为供试品溶液；另取川芎对照药材2g，加乙醚25ml，超声处理
10min，过滤，取滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液；照《中国药典》薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各10μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯＝9∶1为展开剂，展开，展距8cm，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点；
(3)人参的薄层鉴别：取本发明2mL，加水稀释至15ml，用水饱和的正丁醇萃取2次，每次25mL，合并正丁醇萃取液，正丁醇液用0.1％NaOH溶液洗涤2次，每次15mL，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20mL，弃取水层，正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加甲醇1mL溶解，作为供试品溶液；另取对照品人参皂苷Rb1加甲醇制成各含1mg·mL-1的混合溶液作为对照品溶液。照《中国药典》薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水＝15∶40∶22∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃烘至斑点清晰；分别置日光及365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)远志的薄层鉴别：取本发明10ml，用乙醚分2次提取，每次20ml，合并乙醚液，水洗3次，每次30ml，乙醚液低温蒸干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液；另取远志对照药材1.5g，加水50ml煎煮1h，滤过，滤液用乙醚分2次提取，合并提取液，浓缩至
1ml，作为对照药材溶液；照《中国药典》薄层色谱法试验，吸取上述2种溶液各4μl分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以环己烷-氯仿-醋酸乙酯-甲醇＝
30∶15∶5∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
11.如权利要求6所述的治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物的含量测定方法，其特征在于：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-1％冰醋酸＝28∶72为流动相；检测波长为321nm；理论塔板数按阿魏酸峰计算，应不低于2000；精密称取阿魏酸对照品适量，加甲醇制成每ml含12ug的溶液，作为对照品溶液；精密吸取本发明1ml，置25ml的容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；照《中国药典》高效液相色谱法，精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5ul，分别注入液相色谱仪，测定，即得。
12.权利要求1、2或3所述的中药组合物在制备治疗智力低下及老年痴呆药物中的应用。

治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物及其制法和检测方\n法\n技术领域\n[0001] 本发明涉及一种中药组合物及其制法和检测方法，特别是一种治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物及其制法和检测方法。\n背景技术\n[0002] 痴呆是因脑功能障碍而产生的获得性和持续性智能障碍综合征。老年痴呆是一种慢性进行性精神衰退性疾病，并随着人民生活水平的提高，寿命的大幅增加，人口老龄化趋势的加快而大幅增加，对社会经济发展和老年卫生保健带来了巨大挑战。《中国实验方剂学》杂志2010年8月第16卷第9期《健脑生智口服液对老年痴呆小鼠模型的作用》(庞来祥等著)公开了一种治疗智力低下及老年痴呆的中药---健脑生智口服液，由人参、石菖蒲、川芎、银杏叶、熟地、远志制成，但没有公开具体的原料配比，在原来成果的基础上，我们通过实践找到了科学的配比，疗效显著。\n发明内容\n[0003] 本发明的目的在于提供一种既有确切疗效，又能较好地改善临床症状、副作用少、价格便宜的治疗智力低下及老年痴呆的中药组合物。\n[0004] 本发明的又一目的在于提供该中药组合物制剂的制备方法。\n[0005] 本发明的另外一个目的在于提供该中药组合物口服液的检测方法。\n[0006] 本发明技术方案是这样实现的：\n[0007] 按照重量份计，制成该中药组合物有效组分的原料为：人参190-310、石菖蒲\n190-310、川芎190-310、银杏叶190-310、熟地225-375、远志110-190。\n[0008] 优选为：人参220-280、石菖蒲220-280、川芎220-280、银杏叶220-280、熟地\n260-340、远志130-170。\n[0009] 最优选为：人参250、石菖蒲250、川芎250、银杏叶250、熟地300、远志150。\n[0010] 本发明中药组合物具有益气活血，补肾填精，祛痰开窍的作用。用于肾虚髓减、痰瘀阻窍所致的智力低下及老年痴呆的治疗。\n[0011] 本发明中药组合物可以是药剂学上可接受的剂型，包括丸剂、颗粒剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、片剂、滴丸剂、口服液体制剂等，优选口服液。\n[0012] 川芎、石菖蒲两味蒸馏提取挥发油；人参、银杏叶、熟地、远志进行水煎；加适宜辅料，制成制剂。\n[0013] 本发明中的辅料可以是药剂学上可接受的任意赋形剂或载体。\n[0014] 制备方法优选：川芎、石菖蒲加8-12倍量水蒸馏2-9小时，提取挥发油备用或包合干燥，残留液另器收集；人参、银杏叶、熟地、远志加8-12倍量水煎煮1-3次，每次1-2小时，合并滤液及上述残留液，滤过，减压浓缩至20℃相对密度为1.00-1.20，加乙醇使含醇量达\n40-70％，静置8-30小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至20℃相对密度为1.00-1.10，静置\n12-30小时，取上清液滤过或浓缩干燥、加入挥发油及适宜辅料，制成制剂。\n[0015] 其中口服液又优选：川芎、石菖蒲加10倍量水蒸馏6小时，提取挥发油备用，残留液另器收集；人参、银杏叶、熟地、远志加10倍量水煎煮三次，每次1.5小时，合并滤液及上述残留液，滤过，减压浓缩至20℃相对密度为1.08-1.10，加乙醇使含醇量达50％，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至20℃相对密度为1.06，静置24小时，取上清液滤过，滤液加入上述挥发油、适量增溶剂、矫味剂、防腐剂等，滤过，分装，灭菌，即得。\n[0016] 特别是：人参250g、石菖蒲250g、川芎250g、银杏叶250g、熟地300g、远志150g；川芎、石菖蒲加10倍量水蒸馏6小时，提取挥发油备用，残留液另器收集；人参、银杏叶、熟地、远志加10倍量水煎煮三次，每次1.5小时，合并滤液及上述残留液，滤过，减压浓缩至20℃相对密度为1.08-1.10，加乙醇使含醇量达50％，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至20℃相对密度为1.06，静置24小时，取上清液滤过，滤液加入上述挥发油、吐温-80及适量矫味剂等，调整体积至1000ml，滤过，分装，灭菌，即得。\n[0017] 对于最后方法制得的口服液的检测方法包括：石菖蒲、川芎、人参、远志的薄层鉴别，相对密度、pH值的检查、阿魏酸的含量测定。\n[0018] 一、性状：本发明为棕褐色澄清液体；味甜微苦。\n[0019] 二、鉴别：\n[0020] (1)石菖蒲的薄层鉴别：取本发明8ml，用乙醚萃取2次，每次20ml，分取乙醚层，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml，使溶解，作为供试品溶液。另取石菖蒲对照药材2g，加乙醚\n25ml，超声处理10min，过滤，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml，使溶解，作为对照药材溶液。\n照薄层色谱法(2010年版《中国药典》一部附录VI B)试验，吸取上述2种溶液各5μl，分别点于同一含0.5％CMC-Na溶液为粘合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)-醋酸乙酯(8∶2)为展开剂，展开，展距8cm，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点，再以碘蒸气熏至斑点显色清晰，日光下检视，显相同的棕褐色斑点。\n[0021] (2)川芎的薄层鉴别：取本发明8ml，用乙醚萃取2次，每次20ml，分取乙醚层，蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml，使溶解，作为供试品溶液。另取川芎对照药材2g，加乙醚25ml，超声处理10min，过滤，取滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(2010年版《中国药典》一部附录VI B)试验，吸取上述2种溶液各10μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯(9∶1)为展开剂，展开，展距8cm，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。\n[0022] (3)人参的薄层鉴别：取本发明2mL，加水稀释至15ml，用水饱和的正丁醇萃取\n2次，每次25mL，合并正丁醇萃取液，正丁醇液用0.1％NaOH溶液洗涤2次，每次15mL，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20mL，弃取水层，正丁醇液置水浴上蒸干，残渣加甲醇1mL溶解，作为供试品溶液。另取对照品人参皂苷Rb1加甲醇制成各含1mg·mL-1的混合溶液作为对照品溶液。照薄层色谱法(2010年版《中国药典》一部附录VI B)试验，吸取上述2种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿醋酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，凉干，喷以10％硫酸乙醇溶液，于105℃烘至斑点清晰。分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。\n[0023] (4)远志的薄层鉴别：取本发明10ml，用乙醚分2次提取，每次20ml合并乙醚液，水洗3次，每次30ml，乙醚液低温蒸干，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取远志对照药材1.5g，加水50ml煎煮1h，滤过，滤液用乙醚分2次提取，合并提取液，浓缩至1ml，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(2010年版《中国药典》一部附录VI B)试验，吸取上述2种溶液各4μl分别点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以环己烷-氯仿-醋酸乙酯-甲醇(30∶15∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。\n[0024] 三、检查：\n[0025] 1、相对密度：应不低于1.05(《中国药典》2010年版一部附录VII A)。\n[0026] 2、pH值：应为4.0-6.0(2010年版《中国药典》一部附录VII G)。\n[0027] 3、其他：应符合合剂项下的有关规定(《中国药典》2010年版一部附录I J)。\n[0028] 四、含量测定\n[0029] 照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI D)测定。\n[0030] 色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-1％冰醋酸(28∶72)为流动相；检测波长为321nm；理论塔板数按阿魏酸峰计算，应不低于2000。\n[0031] 对照品溶液的制备：精密称取阿魏酸对照品适量，加甲醇制成每ml含12μg的溶液，作为对照品溶液。\n[0032] 供试品溶液的制备：精密吸取本发明1ml，置25ml的容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。\n[0033] 测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。\n[0034] 本发明每ml含川芎以阿魏酸(C10H10O4)计，应不低于250ug。\n[0035] 五、用法用量：口服，一次20ml，一日2次。\n[0036] 六、规格：每支装20ml。\n[0037] 呆者，痴也，癫也，不慧也，不明事理之谓也。后世医家根据其特点又称谓呆病。主要表现为记忆障碍，智能减退，行为性格改变，严重者可丧失生活自理能力，多归于“郁证”、“痴呆”、“癫狂”范畴。本病是一种全身性疾病，病位在脑，与心肝脾肾功能失调密切相关，病因以内因为主。由于七情内伤，久病耗损，年迈体虚，致气、血、痰、瘀、郁为患，渐使脑髓空虚，或气血不足，肾精亏耗，痰瘀互阻，脑髓失养发为本病。“肾为五脏六腑之本，元气之根”，肾藏精生髓，肾精亏虚，不能生髓，“髓海不足，则脑转耳鸣，胫酸眩冒，目无所见，懈怠安卧”。随着年龄增长，以肾虚为主的五脏虚衰逐渐发生，导致气机滞涩不利，津液运行障碍，而生痰瘀。“痴呆症凡平素无痰，而或以郁结，或以不遂，……渐致痴呆”，“治呆之奇法，治痰即治呆也”。老年痴呆患者舌质多为紫暗、暗淡或有瘀点、瘀斑，而苔腻的出现率也是最高，也证实了血瘀和痰湿的存在。临床对脑动脉硬化、脑血管痴呆等病多从瘀血论治并收到较好疗效，也说明瘀血是影响脑衰老和导致老年痴呆发生的一个重要因素。总之，老年痴呆是以本虚标实为特征的中老年多发病，其本虚主要在于肾精不足，髓海亏虚，清阳不升；其标实在于痰浊、瘀血蒙蔽脑窍，闭阻脑络。\n[0038] 本发明治疗老年痴呆基于对其病因病机的深刻认识组方而成。方中人参大补元气，使气旺则阴血自生，且又安神益智，为君药。《神农本草经》：“补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，除邪气，明目，开心益智”。川芎味辛性温，既能行散舒郁，又善通利血脉，芳香走窜，能升能降，善于上行头目，入脑开闭，也为通行气血之要药，《本草汇言》指出：“川芎上行头目，下调经水，中开郁结，血中气药，……味辛性阳，气善下窜而无阴凝黏滞之态，虽入血分，又能去一切风，调一切气”；熟地黄质地柔润，味甘而厚，性温不燥，长于滋补真阴，生精血，填骨髓，充脑海，聪耳明目，养神益智《药品化义》对其功效的总结为“滋补真阴，封填骨髓，为圣药也”，两药用为臣，与君药配伍，可使血行流利，脑络通畅，精得上乘而充髓，血得上行而养脑，，奏活血祛瘀，开窍醒神之效。石昌蒲辛温，芳香利窍，善宣气除痰、开窍醒神，《神农本草经》称它“开心孔，通九窍”，孙思邈言：“久服轻身，聪耳明目，不忘，不迷惑，益心智，高志不老”；远志辛苦微寒，长于祛痰开窍，安神益志，《神农本草经》总结其功效为“益智慧，耳目聪明，不忘”，《药性论》指出：“治健忘，安魂魄，令人不迷”，石菖蒲偏辛散以宣其痰湿，远志偏苦降以泄上逆之痰窒，银杏叶性甘苦涩，具有益心敛肺、化湿止泻、活血化瘀、通脉舒络的作用，三药共为佐，以助君臣为用，使气顺而壅自开，气血不复上菀，痰浊消散不蒙清窍，神志自可清明，川芎上行头目，是臣药而兼使药为用也。全方诸药配伍，共奏益气活血、补肾填精、祛痰开窍之功，用于肾虚髓减、痰瘀阻窍所致的智力低下及老年痴呆有良效。如能常服，可保耳聪目明、神识清爽、智慧聪颖、发颜如童，如此则无健忘痴呆之虞。\n[0039] 本发明中药制剂主要药效学实验结果如下：以本发明口服液为例。\n[0040] 一、受试药物：\n[0041] 人参250g、石菖蒲250g、川芎250g、银杏叶250g、熟地300g、远志150g；川芎、石菖蒲加10倍量水蒸馏6小时，提取挥发油备用，残留液另器收集；人参、银杏叶、熟地、远志加\n10倍量水煎煮三次，每次1.5小时，合并滤液及上述残留液，滤过，20℃减压浓缩至相对密度1.08-1.10，加乙醇使含醇量达50％，静置24小时，取上清液，回收乙醇并20℃浓缩至相对密度1.06，静置24小时，取上清液滤过，滤液加入上述挥发油，滤过，灭菌，即得。\n[0042] 二、药效试验\n[0043] 1、对东莨菪碱致老年痴呆模型大鼠脑AchE、脑蛋白含量的影响\n[0044] 1.1方法 取大鼠60只，雌雄各半，按体重随机均分为6组，分别为正常对照组，模-1 -1 -1\n型组，阳性脑复康组(0.3g·kg )，本发明高剂量组(16.8g·kg )，中剂量组(8.4g·kg )，-1 -1\n低剂量组(4.2g·kg )，正常组，模型组给予等体积蒸馏水。灌胃体积为10mL·kg ，1天\n1次，连续10d。同时开始迷路训练，于训练前20min，除正常组外，各组腹腔注射东莨菪碱-1\n2mg·kg ，连续训练9d。末次给药后2h，脱臼法处死动物，快速取出大鼠脑组织(去除小脑)，置预冷生理盐水中漂洗，滤纸拭干，称重后，迅速浸入冷生理盐水中(为组织重量的9-1 -1\n倍)，用匀浆器在冰浴中制成100mg·mL 的组织匀浆，以3000r·min ，离心10min，取上清液用于测定AchE、脑蛋白含量。\n[0045] 1.2结果 模型组大鼠脑组织AchE活性明显升高，与正常组，有显著性差异(P＜0.05)；本发明高、中剂量组的AchE活性也显著降低，与模型组，有显著性差异(P＜0.05)；低剂量组有降低AchE活性的趋势；提示脑复康及本发明抗老年痴呆的治疗作用是通过降低AchE活性、升高Ach含量和提高中枢胆碱能系统的作用实现的。\n[0046] 模型组大鼠脑蛋白含量明显减少，与正常组有显著性差异(P＜0.05)；与模型组相比本发明高、中剂量组大鼠的脑蛋白含量均明显增多(P＜0.05)；表明本发明对老年痴呆的学习记忆功能的影响可能与脑蛋白合成有关。\n[0047] 表1对东莨菪碱致老年痴呆模型大鼠脑AchE、脑蛋白含量的影响( n＝10)[0048] \n[0049] 注：与模型组比较，P＜0.05\n[0050] 2、对AlCl3致老年痴呆模型大鼠的学习记忆功能的影响\n[0051] 2.1方法 取大鼠60只，雌雄各半，除阳性健脑胶囊组(0.162g·kg-1)外，分组同-1\n2.1项目。造模前禁食8h，除正常对照组外，各组隔日腹腔注射AlCl3 100mg·kg ，连续50d。\n-1\n造模后20d，灌胃给药为10mL·kg ，1天1次，共30d。末次给药后20min，通过Mirros水迷宫法测定大鼠记忆功能。于记忆功能测定结束后次日给药2h后，用脱臼法各组处死4只-1\n大鼠，进行病理学观察。取出完整大脑用100mg·mL 甲醛溶液固定，常规石蜡切片，冠状连续切片海马组织每5张取1张。分别采用HE染色和网状纤维染色，光学显微镜下观察脑海马结构老年斑、神经元纤维缠结变化。余下大鼠快速剥离脑组织，称其湿重，计算脑湿重指-1\n数(脑湿重指数＝脑湿重/体重×100)。将脑(去除小脑)依2.1项下制成100mg·mL\n-1\n组织匀浆液，以3000r·min ，离心10min，取上清液测定β-AP含量。将结果进行t检验。\n[0052] 2.2结果造模前各组比较无差异；造模后模型组与空白组，有显著性差异(P＜0.05)。用药后各组水迷宫所用时间较模型组缩短，其中健脑胶囊组、本发明高、中、低剂量组能明显缩短所用时间，与模型组，有显著性差异(P＜0.05)。说明：本发明具有增强老年痴呆大鼠学习记忆功能。详见表2\n[0053] 模型组与空白组比较，脑湿重指数明显降低，有显著性差异(P＜0.05)。本发明高、中剂量组明显升高脑湿重指数与模型组有显著的差异(P＜0.05)；本发明低剂量组脑湿重指数均有所提高。说明：本发明对提高老年痴呆大鼠脑湿重指数效果较好。\n[0054] 模型组与空白组比较，脑组织中β-AP含量明显增高，有显著性差异(P＜0.05)。\n各治疗组与模型组相比较，脑组织中β-AP含量均有不同程度下降，其中本发明高、中、低剂量组能明显降低脑组织中的β-AP含量，与模型组相比有显著性差异(P＜0.05)。说明：\n本发明可能通过降低老年痴呆大鼠脑组织中β-AP含量从而达到抗老年痴呆的作用。详见表3。\n[0055] 表2对AlCl3致老年痴呆模型大鼠水迷宫作用的影响( n＝10)\n[0056] \n[0057] 注：与模型组比较，#P＜0.05\n[0058] 表3对AlCl3致老年痴呆模型大鼠脑湿重指数、β-AP含量的影响( n＝10)[0059] \n[0060] 注：与模型组比较，#P＜005\n[0061] 病理切片结果：\n[0062] 空白组：海马区脑组织切片中锥体细胞显示清楚，形态正常，未见神经元纤维缠结及老年斑。模型组：海马区脑组织切片HE染色高倍镜下可清楚看到大量神经元纤维缠结；\n网状纤维染色高倍镜下可清楚看到数个老年斑，说明造模成功。\n[0063] 健脑胶囊组：海马区脑组织切片HE染色高倍镜下可见神经元纤维缠结数目较前明显减少，在视野内未见老年斑，说明健脑胶囊可减少老年痴呆大鼠脑组织中老年斑的数目。\n[0064] 本发明高、中剂量组：海马区脑组织切片HE染色及网状纤维染色高倍镜下视野内锥体细胞显示清晰，均未见神经元纤维缠结及老年斑；低剂量组的海马区脑组织切片网状纤维染色高倍镜下可见到数个老年斑，说明本发明高、中剂量组有减少老年痴呆大鼠海马区脑组织中神经元纤维缠结及老年斑数目的作用。\n[0065] 3、对老年性痴呆模型大鼠脑组织SOD、MDA含量、Na+-k+-ATP酶活性的影响[0066] 3.1方法取大鼠60只，♀，按体重随机分为6组，每组10只，分别为正常对照组，模型组，阳性脑复康组(0.301g·kg-1)，本发明高剂量组(16.8g·kg-1)，中剂量组(8.4g·kg-1)，低剂量组(4.2g·kg-1)，正常组，模型组给予等体积蒸馏水，给药体积为10mL·kg-1，每天一次，连续10d。同时开始迷路训练，于训练前20min，除正常组外，各组腹腔注射东莨菪碱\n2mg·kg-1，连续训练9d，末次给药后2h，脱臼法处死动物，快速取出大鼠脑组织(去除小脑)，置预冷生理盐水中漂洗，滤纸拭干，称重后，迅速浸入冷生理盐水中(为组织重量的9倍)，用匀浆器在冰浴中制成10％的组织匀浆，以3000r·min-1，离心10min，取上清液用于测定SOD活性、MDA活性、Na+-k+-ATP酶活性。\n[0067] 3.2结果模型组大鼠脑组织SOD活性明显降低，与正常组比较，有显著性差异(P＜0.05)；脑复康组及本发明高、中剂量组SOD活性逐渐升高呈剂量依赖性，与模型组相比，均有显著性差异(P＜0.05)，本发明高剂量组SOD值明显高于脑复康组，与脑复康组相比有显著性差异(P＜0.05)，提示本发明优于脑复康。表明本发明对老年性痴呆的改善治疗作用可能是通过提高SOD活性，使脑组织氧自由基减少而实现的。\n[0068] 模型组大鼠脑组织MDA活性明显升高，与正常组比较，有显著性差异(P＜0.05)；\n脑复康组及本发明高、中、低剂量组大鼠脑组织MDA含量明显降低，与模型组比较，有显著性差异(P＜0.05)；本发明高剂量组大鼠脑组织MDA含量明显降低，与脑复康组相比有显著性差异(P＜0.05)，提示本发明较脑复康组为优。表明本发明对老年痴呆患者学习记忆功能的影响与MDA活性有关。\n[0069] 模型组的Na+-K+-ATP酶活性明显降低，与正常组比较，有显著性差异(P＜0.05)；\n+ +\n脑复康及本发明高、中、低剂量组能明显提高Na-K-ATP酶活性，与模型组比较有显著性差+ +\n异(P＜0.05)。本发明高剂量组Na-K-ATP酶活性明显高于脑复康组，与脑复康组比较，有显著性差异(P＜0.05)，提示本发明优于脑复康。表明本发明对老年性痴呆的影响与+ +\nNa-K-ATP酶活性有关。\n[0070] 表4对老年性痴呆模型大鼠脑组织SOD、MDA活性、Na+-K+-ATP酶活性的影响(n＝10)\n[0071] \n[0072] 注：与模型组比较，#P＜0.05；\n[0073] 4、对老年性痴呆模型大鼠血及脑中AchE活性、脑蛋白含量的影响\n[0074] 4.1方法取大鼠60只，♀♂各半，除阳性健脑胶囊组(0.162g·kg-1)外，分组同上。\n-1\n造模前禁食8h，除正常对照组外，各组隔日腹腔注射1％AlCl3 100mg·kg ，连续50d。造-1\n模后20d，灌胃给药为10mL·kg ，每天一次，共30d。末次给药后2h，取脑(去除小脑)依-1\n2.1项下制成10％组织匀浆液，以3000r·min ，离心10min，取上清液测定脑AchE活性、脑蛋白含量。将结果采用spss12.0统计软件进行处理，进行t检验，比较组间差异。\n[0075] 4.2结果 模型组大鼠脑组织AchE活性明显升高，与正常组，有显著性差异(P＜0.05)；本发明高、中、低剂量组的AchE活性也显著降低，与模型组，有显著性差异(P＜0.05)；提示脑复康及本发明抗老年痴呆的治疗作用是通过降低AchE活性、升高Ach含量和提高中枢胆碱能系统的作用实现的。\n[0076] 模型组与空白组比较脑组织中总蛋白含量明显降低，有显著性差异(P＜0.05)；\n本发明高、中剂量组、健脑胶囊组能明显升高脑组织中总蛋白的含量，与模型相比有显著性差异(P＜0.05)；本发明低剂量组能增加脑蛋白含量，但与模型组比较无统计学意义(P＞\n0.05)。说明本发明对抗老年痴呆可能于升高大鼠脑组织中总蛋白含量有关。\n[0077] 表5对老年性痴呆模型大鼠脑AchE活性、脑蛋白含量的影响( n＝10)\n[0078] \n[0079] 注：与模型组比较，#P＜0.05；\n[0080] 5、对老年痴呆模型小鼠学习记忆功能及脑组织SOD、MAO、Na+-K+-ATPase活性的影响\n[0081] 5.1分组及给药取健康成年ICR小鼠60只，随机均分为6组，分别为正常对照组、模型对照组、脑复康组、本发明高、中、低剂量组。除正常对照组注射等量生理盐水外其-1\n余各组每天颈背部scl％D-半乳糖140mg·kg ，共6周。造模2周后ig给药，脑复康组-1 -1\n(0.6g·kg )、本发明高、中、低剂量组(分别为25，12.5，6.25g生药·kg )、正常组、模型组ig等量的蒸馏水，共4周。\n[0082] 5.2指标测定\n[0083] 5.2.1学习记忆功能的测定(跳台法)该装置为15cm×30cm×30cm的箱，箱底铺以铜栅，铜丝直径为2mm，间距为5mm，电流强度由一个可调变压器控制，通以36V电流，箱内左前侧放置一个高和直径均为4.5cm的橡皮垫作为小鼠逃避点击的安全区。将小鼠放入箱中自由活动3min，熟悉环境，然后箱底通以电流，其正常反应时跳上平台以躲避伤害性刺激。记录自放入第1次跳下平台受电击的时间为潜伏期及5min内跳下平台受电击的次数为错误数，作为学习成绩。24h后，再将鼠置于平台上，记录自放入至第1次跳下平台受电击的时间为潜伏期及5min内跳下平台受电击的次数为错误数，作为记忆成绩。结果经t检验比较组间差异(下同)。\n[0084] 5.2.2SOD、MAO、Na+-K+ATPase含量的测定于记忆功能测定结束后次日，脱颈椎处死动物，在冰台上快速取出小脑组织并置于冰生理盐水中漂洗，除去血迹，滤纸拭干，精确称重后，将小脑组织迅速浸入9倍量冷生理盐水中，用匀浆器在冰浴中充分碾磨，制成10％-1\n脑组织匀浆，以3000r·min 离心10min，取上清液待用。按试剂盒说明书测定SOD、MAO、+ +\nNa-K-ATPase活性。\n[0085] 5.3结果：\n[0086] 5.3.1本发明对模型小鼠学习记忆功能的影响\n[0087] 模型组小鼠学习记忆潜伏时间明显缩短，学习记忆错误次数明显增多，与正常组比较有显著性差异(P＜0.01)；本发明高、中、低剂量组能明显增加痴呆小鼠学习记忆潜伏时间，与模型组比较(P＜0.01)，同时使学习记忆错误次数明显减少(P＜0.01)。\n[0088] 表6对小鼠学习记忆功能的影响( n＝10)\n[0089] \n# *\n[0090] 注：与模型组相比，P＜005，P＜0.01\n+ +\n[0091] 5.3.2本发明对模型小鼠脑组织SOD、MAO、Na-K-ATPase活性的影响\n+ +\n[0092] 模型组小鼠SOD、Na-K-ATPase活性明显降低、MAO活性增高，与正常组比较有显+ +\n著性差异(P＜0.01)；本发明高、中、低剂量组能明显升高老年痴呆小鼠SOD、Na-K-ATPase活性、降低MAO的活性，与模型组比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01＝。\n[0093] 表7对小鼠脑组织SOD、MAO、Na+-K+-ATPase活性影响( n＝10)\n[0094] \n# *\n[0095] 注：与模型组相比，P＜0.05，P＜0.01\n具体实施方式\n[0096] 实施例1：人参220、石菖蒲190、川芎220、银杏叶190、熟地260、远志110；川芎、石菖蒲加8倍量水蒸馏9小时，提取挥发油备用，残留液另器收集。挥发油用β环状糊精制成包合物，减压干燥。人参、银杏叶、熟地、远志加8倍量水煎煮2次，每次1.5小时，合并滤液及上述残留液，滤过，减压浓缩(-0.08MPa)至相对密度1.00-1.10(20℃)，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，取上清液，回收乙醇并浓缩至相对密度1.05(20℃)，静置12小时，取上清液滤过，浓缩至相对密度1.25，减压干燥，粉碎成细粉，与微晶纤维素、挥发油的β环状糊精包合物混匀，压片，薄膜包衣，即得片剂。\n[0097] 实施例2：人参280、石菖蒲220、川芎280、银杏叶220、熟地340、远志130；川芎、石