一种基于位点特异性重组的克隆方法

发明专利无效专利

申请号：
CN201010197950.X
IPC分类号：C12N15/11;C12N15/63;C12N15/66;C12N15/09;C12Q1/68
申请日期：
2010-06-10
申请人：
复旦大学

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著录项信息

专利名称	一种基于位点特异性重组的克隆方法
申请号	CN201010197950.X	申请日期	2010-06-10
法律状态	驳回	申报国家	暂无
公开/公告日	2010-12-22	公开/公告号	CN101921747A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/11 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;1;1;;;C;1;2;N;1;5;/;6;3;;;C;1;2;N;1;5;/;6;6;;;C;1;2;N;1;5;/;0;9;;;C;1;2;Q;1;/;6;8查看分类表>
申请人	复旦大学	申请人地址	上海市邯郸路220号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	复旦大学	当前权利人	复旦大学
发明人	丁晓明;张霖;赵国屏
代理机构	上海正旦专利代理有限公司	代理人	陆飞;盛志范

摘要

本发明属于生物技术和基因工程技术领域，具体为一种基于位点特异性重组的克隆方法。本发明基于丝氨酸重组酶φBT1integrase的体外应用。本发明提供一对突变的整合酶识别序列，其被识别与切割的效率同野生型相当。在此基础上构建含有野生型和突变识别位点的用于位点特异性重组克隆的载体pDZM102，并提供目的基因克隆时引物序列的设计方法。本发明提供的克隆方法高效快速，特异性高，只需要在PCR扩增引物序列5’端加上整合酶识别位点，即可摆脱繁琐的酶切连接实现目的基因的快速克隆。

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