利用K1E噬菌体RNA聚合酶和启动子的双质粒系统在真核细胞表达病毒蛋白的方法

发明专利有效专利

申请号：
CN202011145191.2
IPC分类号：C12N15/85;C12N15/66;C07K14/165;C07K14/435
申请日期：
2020-10-23
申请人：
华南农业大学

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专利名称	利用K1E噬菌体RNA聚合酶和启动子的双质粒系统在真核细胞表达病毒蛋白的方法
申请号	CN202011145191.2	申请日期	2020-10-23
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2021-02-02	公开/公告号	CN112301054A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/85 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/63 使用载体引入外来遗传物质；载体；其宿主的使用；表达的调节〔5〕 C12N15/79 专门适用于真核细胞宿主的载体或表达系统〔5〕 C12N15/85 用于动物细胞〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;8;5;;;C;1;2;N;1;5;/;6;6;;;C;0;7;K;1;4;/;1;6;5;;;C;0;7;K;1;4;/;4;3;5查看分类表>
申请人	华南农业大学	申请人地址	广东省广州市天河区五山路483号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	华南农业大学	当前权利人	华南农业大学
发明人	冯涛声;刘定祥;李淑敏;丘祖纯
代理机构	广州市华学知识产权代理有限公司	代理人	苏运贞

摘要

本发明公开了一种利用K1E噬菌体RNA聚合酶和启动子的双质粒系统在真核细胞质表达蛋白的方法。本发明通过将NP868R帽状酶片段构建至含有K1ERNA聚合酶表达序列的载体，得到重组载体A；将目的蛋白的cDNA序列构建至含有K1E启动子的载体，得到重组载体B；将重组载体A和重组载体B转染至宿主真核细胞中进行表达，得到目的蛋白。本发明提供的方法能将难以通过传统蛋白外源表达方法表达的蛋白进行表达，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗。

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