一种分枝杆菌的17β-羟基类固醇脱氢酶突变体及其异源表达

发明专利有效专利

申请号：
CN202011620795.8
IPC分类号：C12N9/04;C12N15/53;C12N15/75;C12N1/21;C12P33/06;C12R1/125
申请日期：
2020-12-31
申请人：
江南大学

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专利名称	一种分枝杆菌的17β-羟基类固醇脱氢酶突变体及其异源表达
申请号	CN202011620795.8	申请日期	2020-12-31
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2021-04-02	公开/公告号	CN112592904A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N9/04 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N9/00 酶，如连接酶（6.）；酶原；其组合物（用于清洁牙齿的含酶的制剂入A61K 8/66、A61Q 11/00；含酶或酶原的医药制剂入A61K 38/43；含酶去污剂组合物入C11D）；制备、活化、抑制、分离或纯化酶的方法〔3〕 C12N9/02 氧化还原酶（1.），如萤虫素酶〔3〕 C12N9/04 作为供体作用于CHOH基团，如葡萄糖氧化酶、乳酸脱氢酶（11）〔3〕	IPC分类号	C;1;2;N;9;/;0;4;;;C;1;2;N;1;5;/;5;3;;;C;1;2;N;1;5;/;7;5;;;C;1;2;N;1;/;2;1;;;C;1;2;P;3;3;/;0;6;;;C;1;2;R;1;/;1;2;5查看分类表>
申请人	江南大学	申请人地址	江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	江南大学	当前权利人	江南大学
发明人	许正宏;李会;刘伟
代理机构	南京经纬专利商标代理有限公司	代理人	唐蕙芬

摘要

本发明公开了一种分枝杆菌的17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体及其异源表达，属于酶基因工程及酶工程领域。本发明提供一种来自于分枝杆菌(Mcobacteriumsp.)LY‑1的放线菌17β‑羟基类固醇脱氢酶17β‑HSDy1及其基因序列，以pMA5为表达质粒，以枯草芽孢杆菌WB600为表达宿主，实现了分枝杆菌LY‑1的17β‑HSDy1的外源表达。对软件模拟获得的该酶关键T239位点，突变成了酪氨酸，酶活提高了19.2％，达到9571.77U·mg‑1。对突变获得的重组枯草芽孢杆菌WB600‑pMA5‑17βHSDy1‑T239Y进行酶活‑生长曲线的测定，在发酵28h时，重组枯草芽孢杆菌WB600‑pMA5‑17βHSDy1‑T239Y的比酶活达到最高。该异源表达菌株可用于雄甾烯‑1，4‑烯‑3，17‑二酮转化宝丹酮的生产，具有潜在的工业应用。

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