联合免疫基因抑制高危型HPV表达的sgRNA、基因敲除载体及其应用

发明专利有效专利

申请号：
CN201610134003.3
IPC分类号：C12N15/113;C12N15/85
申请日期：
2016-03-09
申请人：
李旭

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专利名称	联合免疫基因抑制高危型HPV表达的sgRNA、基因敲除载体及其应用
申请号	CN201610134003.3	申请日期	2016-03-09
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2016-08-03	公开/公告号	CN105821040A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/113 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/113 调节基因表达的非编码核酸，如反义寡核苷酸〔2010.01〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;1;1;3;;;C;1;2;N;1;5;/;8;5查看分类表>
申请人	李旭	申请人地址	陕西省西安市雁塔西路277号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	李旭	当前权利人	李旭
发明人	甄帅;李旭;赵乐;罗文娟
代理机构	西安通大专利代理有限责任公司	代理人	徐文权

摘要

本发明提供联合免疫基因抑制高危型HPV表达的sgRNA、基因敲除载体及其应用：具体包括选择适合CRISPR‑Cas9靶向剪辑的人乳头瘤病毒16型基因和人PD‑1基因的sgRNA序列，将其与CRISPR‑Cas9核酸酶基因的表达载体转入HPV16+的人宫颈癌细胞、荷HPV16+移植瘤小鼠，可以明显降低HPV16的表达，并抑制肿瘤的生长。本发明制备的基因表达载体方法步骤简单、sgRNA靶向性好、CRISPR‑Cas9系统的敲除效率高,并且不仅能够精确靶向剪接高危型HPV16型和PD‑1基因，高效降低高危型HPV16型的基因表达，联合应用还能明显抑制肿瘤的生长。

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