一种用单壁碳纳米管缩短彩色马蹄莲组培繁殖周期的方法

1.一种用单壁碳纳米管缩短彩色马蹄莲组培繁殖周期的方法，其特征在于：
A外植体消毒：选取直径约2cm的健康的彩色马蹄莲小种球，用2g/L多菌灵水溶液浸泡15min后，浅埋于经高压灭菌处理后的湿润的细沙基质中，在光照3000lx(12h/d)、(25±1)℃的条件下进行预培养，令种球萌发；7～10d后，选取芽长约1cm的种球，经表面消毒后接种。具体消毒方法为：用软毛刷将块茎刷洗干净，避免损伤顶芽，削去块茎表皮，在安利洗涤剂溶液中振荡20min，再用2g/L多菌灵溶液浸泡1h，自来水冲洗40min，转入超净台，切除块茎表层，保留直径约1.5cm的带芽块茎，75％酒精浸泡15S，无菌水冲洗1次，而后以0.2％的升汞消毒15～20mmin。处理完毕后，无菌水冲洗6～8次，无菌吸水纸吸干水分。
B芽诱导培养：将消毒好的彩色马蹄莲种球切成直径约1cm的带芽小块，接种至下列培养基中：MS基本培养基，蔗糖30g/L，生长激素0.1～0.2mg/L，细胞分裂素0.4～0.5mg/L，pH5.8；在培养温度25±1℃，光照强度为1000～3000lx，光照时间为12～16h下进行光照培养20～30天至分化出芽。30d后继续继代培养，使丛生芽增殖。
C丛生芽继代培养：将诱导出的丛生芽接种到下列培养基中，进行继代培养：蔗糖30g/L，植物生长激素0.1～0.2mg/L，细胞分裂素0.4～0.5mg/L，pH5.8；培养温度25±1℃，光照强度为2000～3000lx，光照时间为12～16h，进行光照培养20-25天，使丛生芽增殖。
D壮苗：将诱导的丛生芽进行单株切割，保留1-2cm茎段，接种至下列培养基中：MS基本培养基，蔗糖35g/L，生长激素0.1～0.2mg/L，细胞分裂素0.4～0.5mg/L，琼脂5.6g/L，单壁碳纳米管40mg/L，pH5.8；培养温度25±1℃，光照强度为2000～3000lx，光照时间为
12～16h，进行光照培养10～15天。20d后进行生根培养。
E生根培养：将诱导的丛生芽进行单株切割，保留2-3cm茎段，接种至下列培养基中：MS基本培养基，蔗糖35g/L，生长激素0.5～0.6mg/L，细胞分裂素0.1～0.2mg/L，琼脂5.6g/L，单壁碳纳米管40mg/L，pH5.8；培养温度25±1℃，光照强度为2000～3000lx，光照时间为12～16h，进行光照培养10～15天。20d后即可进行炼苗移栽。
所述的缩短彩色马蹄莲组培繁殖周期的方法的延伸技术方案包括：所涉及到的植物生长激素包括萘乙酸(NAA)0.1～0.2mg/L，吲哚丁酸(IBA)0.1～0.2mg/L，6-卞基腺嘌呤(6-BA)0.4～0.5mg/L。
2.根据权利要求1所述的提高彩色马蹄莲增殖率的方法，其特征在于步骤D中所涉及到的壮苗培养基的配方为MS基本培养基，蔗糖35g/L，生长激素0.1～0.2mg/L，细胞分裂素0.4～0.5mg/L，琼脂5.6g/L，单壁碳纳米管40mg/L，pH5.8。
3.根据权利要求1所述的提高彩色马蹄莲增殖率的方法，其特征在于步骤E中所涉及到的MS基本培养基，蔗糖35g/L，生长激素0.5～0.6mg/L，细胞分裂素0.1～0.2mg/L，琼脂5.6g/L，单壁碳纳米管40mg/L，pH5.8。进行光照培养10～15天。

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