一种自然杀伤细胞的体外培养方法及试剂盒

1.一种自然杀伤细胞的体外培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
（a）从外周血中分离外周血单个核细胞；
（b）将外周血单个核细胞接种至含有活化因子的培养基中进行培养，其中，所述活化因子为抗人 CD52 单克隆抗体，或抗人 CD52 单克隆抗体和OK432；
（c）待培养一段时间后，向培养基中添加增殖因子继续培养，其中，当活化因子为抗人 CD52 单克隆抗体时，所述增殖因子包括IL‑2、OK432和IL‑21；
当活化因子为抗人 CD52 单克隆抗体和OK432时，所述增殖因子包括IL‑2和IL‑21。
2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述在步骤（c）中，增殖因子还包括IL‑15和/或抗人 4‑1BB 单克隆抗体。
3.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述步骤（b）中，培养基中抗人 CD52 单克隆抗体的浓度为50 1000ng/ml。
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4.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述步骤（b）或（c）中，培养基中OK432的浓度为0.005 0.02KE/ml。
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5.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述步骤（c）中，培养一段时间为培养
20 30h；IL‑2的添加终浓度为800 1200U/ml；IL‑21的添加终浓度为15 25ng/ml。
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6.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述IL‑15的添加终浓度为15 25ng/~
ml；所述抗人 4‑1BB 单克隆抗体的添加终浓度为80 120ng/ml。
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7.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述步骤（c）中，培养过程中，间隔1 3~
天向培养基中补添含有自体灭活血浆和IL‑2的X‑VIVO 15培养基至细胞浓度不高于1×
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10cells/ml。
8.根据权利要求7所述的培养方法，其特征在于，所述X‑VIVO 15培养基中自体灭活血浆的体积含量为4% 6%，IL‑2浓度为800 1200U/ml。
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9.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述步骤（b）中，外周血单个核细胞接
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种浓度为（2 4）×10cells/ml；
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培养基为X‑VIVO 15培养基。
10.一种自然杀伤细胞体外培养的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括如下试剂：
抗人 CD52 单克隆抗体、OK432、IL‑2、IL‑21、IL‑15和抗人 4‑1BB 单克隆抗体。

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