鉴定不同免疫磁珠细胞分离器分选细胞效率的方法

1.一种鉴定不同免疫磁珠细胞分离器分选细胞效率的方法，其特征在于，以标有磁珠的淋巴细胞CD3抗体为指标，用流式细胞仪检测分析CD3+阳性细胞百分含量,并用归一法算出相对百分比,比较不同强度的磁体分离器分选多人血液淋巴细胞的分离效果，以达到选取所需磁场的分离器来分选各种细胞。
2.根据权利要求1所述的鉴定不同免疫磁珠细胞分离器分选细胞效率的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取肝素抗凝全血加至聚苯乙烯管中，先加入CD3细胞正选试剂盒自带的红细胞裂解液,再依次加入CD3细胞正选试剂盒中的分选缓冲液和提前预混过的磁性粒子，室温孵育；
(2)加入磁珠分选介质定容，放入待测的细胞分离器的磁体中进行分选,弃去上清液，重复步骤(2)；
(3)用PBS缓冲液重悬细胞，即得到人淋巴细胞中CD3+细胞；
(4)阴性对照、未分选细胞及分选后细胞分别加入抗人CD3抗体，混合均匀，避光孵育，离心弃上清，细胞用体积比浓度为1％多聚甲醛固定，4℃避光，使用流式细胞分析仪检测CD3细胞比例；
(5)采用BD FACSDiVa软件分析T淋巴细胞CD3+阳性细胞百分含量,并采用归一计算方法，算出不同人血液中CD3+阳性细胞的相对百分含量,以比较各种磁体分选不同人血液淋巴细胞的能力，从而选择出所需磁场的分离器用于分选细胞。
3.根据权利要求2所述的鉴定不同免疫磁珠细胞分离器分选细胞效率的方法，其特征在于，所述步骤(2)中放入待测的细胞分离器的磁体中进行分选，分选采用手动方式，将磁体和试管一起上下倾倒10s，回到直立位置静置5min。
4.根据权利要求2所述的鉴定不同免疫磁珠细胞分离器分选细胞效率的方法，其特征在于，所述步骤(2)中放入待测的细胞分离器的磁体中进行分选，分选采用机械旋转方式，将磁体和试管一起旋转1000r 2min静置3min。
5.根据权利要求2所述的鉴定不同免疫磁珠细胞分离器分选细胞效率的方法，其特征在于，所述步骤(2)中磁珠分选介质为含1mmol/L EDTA，2％FBS的0.01mol/L PBS缓冲液，百分数为体积比。
6.根据权利要求2所述的鉴定不同免疫磁珠细胞分离器分选细胞效率的方法，其特征在于，所述CD3细胞正选试剂盒为stemcell公司的CD3细胞正选试剂盒。
7.根据权利要求2所述的鉴定不同免疫磁珠细胞分离器分选细胞效率的方法，其特征在于，所述步骤(2)中重复步骤(2)为3次。
8.根据权利要求2所述的鉴定不同免疫磁珠细胞分离器分选细胞效率的方法，其特征在于，所述流式细胞分析仪为BD_FACSCanto_II型流式细胞分析仪，激光波长为488nm，发射波长为525nm。

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