人胚肾293细胞亚克隆细胞株

发明专利有效专利

申请号：
CN03126889.7
IPC分类号：C12N5/10;C12N15/11;C12N15/53;C12N9/02
申请日期：
2003-06-13
申请人：
张晓志;彭朝晖

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专利名称	人胚肾293细胞亚克隆细胞株
申请号	CN03126889.7	申请日期	2003-06-13
法律状态	暂无	申报国家	中国
公开/公告日	2004-07-21	公开/公告号	CN1513985
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N5/10 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N5/08 （转入C12N 5/071） C12N5/10 经引入外来遗传物质而修饰的细胞，如病毒转化的细胞〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;5;/;1;0;;;C;1;2;N;1;5;/;1;1;;;C;1;2;N;1;5;/;5;3;;;C;1;2;N;9;/;0;2查看分类表>
申请人	张晓志;彭朝晖	申请人地址	广东省深圳市南山区高新技术产业园区（北区）郎山路变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	深圳市赛百诺基因技术有限公司	当前权利人	深圳市赛百诺基因技术有限公司
发明人	张晓志;彭朝晖
代理机构	北京纪凯知识产权代理有限公司	代理人	沙捷

摘要

一种用于生产重组腺病毒制品的人胚肾293细胞亚克隆细胞株，该细胞株是由ATCC 293细胞经亚克隆方法制得，它含有人三磷酸甘油醛脱氢(human glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase，GAPD)，该细胞株由下列方法培养制得：a、将ATCC293细胞(P32)复苏后进行细胞扩增传代至第33代次(P33)，然后将P33细胞悬液用FACS流式细胞仪进行亚克隆；b、用2个96孔板，每孔中0.2ml培养基中放置一个细胞，在36～38℃、3～6%CO2条件下培养6～10天；c、挑选出细胞形态均一、生长良好的、已达到不低于60%铺满生长的克隆；d、重复上述步骤四次，最后挑选出1个亚克隆的细胞柱(P37)，继续培养扩增并制成原代细胞库(P38)，置于-80℃冻存；e、以原代细胞库(P38)为基础制备主代细胞库及工作细胞库。本发明应用基因工程技术和分子克隆技术，使其具有明显增强细胞的贴壁生长的功能和细胞生长倍增时间短的优点。

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