基于CRISPR-Cas12a技术的苹果茎沟病毒可视化检测体系及其检测方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201910886954.X
IPC分类号：C12Q1/70
申请日期：
2019-09-19
申请人：
河南农业大学

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专利名称	基于CRISPR-Cas12a技术的苹果茎沟病毒可视化检测体系及其检测方法
申请号	CN201910886954.X	申请日期	2019-09-19
法律状态	授权	申报国家	暂无
公开/公告日	2019-12-13	公开/公告号	CN110567951A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12Q1/70 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12Q 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（免疫检测入G01N33/53）；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制〔3〕 C12Q1/00 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（带有条件测量或传感器的测定或试验装置，如菌落计数器入C12M1/34）；其组合物；这种组合物的制备方法〔3，2006.01〕 C12Q1/70 包括病毒或噬菌体〔3〕	IPC分类号	C;1;2;Q;1;/;7;0查看分类表>
申请人	河南农业大学	申请人地址	河南省郑州市金水区文化路95号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	河南农业大学	当前权利人	河南农业大学
发明人	郑先波;焦健;冯建灿;黄松;孔康康;韩金蒙;夏炎;白团辉;宋春晖;王苗苗;宋尚伟;陈海燕;张英丽
代理机构	郑州优盾知识产权代理有限公司	代理人	冉珊敏

摘要

本发明属于分子生物学领域，涉及基于CRISPR‑Cas12a技术的苹果茎沟病毒可视化检测体系及其检测方法。根据ASGV保守序列设计出crRNA，并制作用于比色检测的AuNP‑DNA，探究Cas12a蛋白体外切割反应时间和linkerDNA浓度对检测效果的影响，建立最佳ASGV可视化检测体系及检测方法，该方法为恒温反应条件，并通过CRISPR‑Cas12a‑crRNA复合体识别病毒来提高特异性，且linkerDNA具有通用性，不需要昂贵的双标记探针，借助低速离心可在40min内检测多个样本，其检测下限为5.62×102copies/反应，灵敏度比RT‑PCR高100倍。

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