1.用于CRISPR-Cas12a基因编辑方法中进行水稻OsmiR390基因定向敲除的crRNA,其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示。
2.表达权利要求1所述的crRNA的表达载体。
3.根据权利要求书2所述的表达载体,其特征在于:所述的表达载体中的crRNA表达单元的序列为SEQ ID No.2所示。
4.根据权利要求书2所述的表达载体,其特征在于:所述的表达载体中还含有Cas12a蛋白的表达单元。
5.根据权利要求书2所述的表达载体,其特征在于:所述的表达载体中Cas12a蛋白的表达单元的核苷酸序列为SEQ ID No.3所示。
6.根据权利要求书2所述的表达载体,其特征在于:所述表达载体的核苷酸序列为SEQ ID No.9示。
7.权利要求1所述的crRNA或权利要求2~6任一项所述的表达载体在制备水稻miRNA纯合致死突变体中的用途。
8.水稻miRNA纯合致死突变体的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
a、制备权利要求2~6任一项所述的表达载体;
b、用步骤a的得到的表达载体转化水稻,利用CRISPR-Cas12a基因编辑体系得到转化植株;
c、收集转化植株的种子,筛选出miR390敲除的纯合种子,即得水稻miRNA纯合致死突变体。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于:步骤b中所述的转化水稻使用的是农杆菌介导转化。
引用专利(该专利引用了哪些专利)
序号 | 公开(公告)号 | 公开(公告)日 | 申请日 | 专利名称 | 申请人 | 该专利没有引用任何外部专利数据! |
被引用专利(该专利被哪些专利引用)
序号 | 公开(公告)号 | 公开(公告)日 | 申请日 | 专利名称 | 申请人 | 该专利没有被任何外部专利所引用! |