一种兔黑色素细胞的体外分离培养方法

发明专利无效专利

申请号：
CN201611066353.7
IPC分类号：C12N5/071
申请日期：
2016-11-24
申请人：
扬州大学

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著录项信息

专利名称	一种兔黑色素细胞的体外分离培养方法
申请号	CN201611066353.7	申请日期	2016-11-24
法律状态	驳回	申报国家	中国
公开/公告日	2017-03-22	公开/公告号	CN106520671A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N5/071 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N5/06 （转入C12N 5/07） C12N5/07 动物细胞或组织〔2010.01〕 C12N5/071 脊椎动物细胞或组织，例如人类细胞或组织〔2010.01〕	IPC分类号	C;1;2;N;5;/;0;7;1查看分类表>
申请人	扬州大学	申请人地址	江苏省扬州市大学南路88号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	扬州大学	当前权利人	扬州大学
发明人	陈阳;穆琳;赵博昊;胡帅帅;赵斌;杨乃苏;王曼曼;郝晔;朱杰;吴信生
代理机构	南京知识律师事务所	代理人	卢亚丽

摘要

本发明涉及一种原代兔黑色素细胞的分离培养方法，该方法通过酶消化法分离兔黑色素细胞，经M254完全培养基培养后更换M254/HMGS培养基培养至汇合度达到80％～90％，再利用差速消化法去除其他细胞获得纯化的黑色素细胞。大大提高了黑色素细胞的纯度，通过细胞形态观察、L‑DOPA染色、半定量、抗S‑100免疫细胞化学染色法对培养的细胞进行鉴定，结果显示分离的原代黑色素细胞多呈树突状和细长的梭状，L‑DOPA染色呈棕黑色，RT‑PCR分析表明分离的细胞表达黑色素细胞的标志基因，S‑100染色胞质呈棕色。

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