人源化PD-L1肿瘤细胞系及具有该细胞系的动物模型与应用

发明专利有效专利

申请号：
CN201610347749.2
IPC分类号：C12N5/10;C12N15/867;C12N15/12;A01K67/027;A61K49/00;A61K39/395;A61P35/00
申请日期：
2016-05-24
申请人：
苏州系统医学研究所

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著录项信息

专利名称	人源化PD-L1肿瘤细胞系及具有该细胞系的动物模型与应用
申请号	CN201610347749.2	申请日期	2016-05-24
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2016-09-21	公开/公告号	CN105950560A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N5/10 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N5/08 （转入C12N 5/071） C12N5/10 经引入外来遗传物质而修饰的细胞，如病毒转化的细胞〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;5;/;1;0;;;C;1;2;N;1;5;/;8;6;7;;;C;1;2;N;1;5;/;1;2;;;A;0;1;K;6;7;/;0;2;7;;;A;6;1;K;4;9;/;0;0;;;A;6;1;K;3;9;/;3;9;5;;;A;6;1;P;3;5;/;0;0查看分类表>
申请人	苏州系统医学研究所	申请人地址	江苏省苏州市工业园区星湖街218号B5-501单元变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	苏州系统医学研究所	当前权利人	苏州系统医学研究所
发明人	秦晓峰;黄安飞;彭迪
代理机构	南京苏科专利代理有限责任公司	代理人	姚姣阳

摘要

本发明提供了一种人源化PD‑L1肿瘤细胞系，所述细胞系为MC‑38‑hPD‑L1，并建立具有人源化PD‑L1肿瘤细胞系的动物肿瘤模型，同时揭示了一种人源化PD‑L1肿瘤细胞系的构建方法，具体通过CRISPR‑CAS9敲除动物源的PD‑L1，扩大培养获得敲除细胞库，提取DNA进行PCR扩增，回收扩增产物并进行克隆，最后通过慢病毒体系将人源PD‑L1在mPD‑L1 KO的MC‑38细胞系中过表达，随后进行慢病毒的包装及Puromycin筛选获得人源化的PD‑L1的MC‑38细胞系。结果显示抗体治疗后的肿瘤浸润CD8 T淋巴细胞明显表现出更强的杀伤和增殖能力，此外我们也发现抗体治疗后肿瘤浸润的Treg细胞明显被抑制。这从分子机理上进一步证明该方法有效可行。

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