制备鼻病毒蛋白酶抑制剂的合成路线以及关键的中间体

1.合成式IA′化合物或其酸加成盐的方法：

包括如下步骤：
步骤A：制备式IV′化合物：

包括：
(a)用双(三甲基硅烷基)氨基钠和溴乙腈进行式V′化合物的氰 基甲基化反应生成式VI′化合物；

(b)将式VI′化合物依次进行还原、环化和脱保护生成式VII′化 合物；然后

(c)通过将化合物与SO3-吡啶复合物反应，然后将形成的反应混 合物与Ph3P＝CHCO2Et反应将式VII′化合物氧化和烯化；
步骤B：将式IV′化合物脱保护生成式IVA′化合物：
和
步骤C：将式II′化合物和式IVA′化合物进行形成酰胺的反应

2.合成抗细小核糖核酸病毒的化合物的方法，包括：
(a)将式IX′化合物用溴乙腈进行双阴离子烷基化反应制备式X′ 化合物；

(b)将式X′化合物氢化生成式XI′的胺；

(c)将式XI′化合物与Et3N反应生成式XII′的内酰胺酯；

(d)将式XII′的内酰胺酯还原生成式XIII′化合物：
和
(e)将式XIII′化合物通过与Ph3P＝CHCO2Et反应进行氧化，然后 烯化生成式XIV′化合物。

3.权利要求2所述的合成抗细小核糖核酸病毒的化合物的方法， 该方法还包括：
将式XIV′化合物转化成式IV′化合物。

4.权利要求3所述的合成抗细小核糖核酸病毒的化合物的方法， 该方法还包括：
步骤A：将式IV′化合物脱保护生成式IVA′化合物：

和
步骤C：将式II′化合物和式IVA′化合物进行形成酰胺的反应。

本发明的技术领域和工业实用性：\n本发明涉及改进的制备乙基-3-{(5’-甲基异噁唑-3’-羰基)-L- Valψ(COCH2)-L-(4-F-Phe)-L-((S)-吡咯-Ala)}-E-丙酸酯(也称为 AG7088)、其类似物及其可药用盐的方法。本发明还包括用于上述方 法的一组新的关键中间体。\n发明背景：\n细小核糖核酸病毒是一族可以感染人和其它动物的微小的无包 膜的正链含RNA病毒。这些病毒包括人鼻病毒、人脊髓灰质炎病毒、 人柯萨奇病毒、人埃可病毒、人和牛肠道病毒、脑心肌炎病毒、脑膜 炎病毒、足和口腔病毒、甲肝病毒等。人鼻病毒是普通感冒的主要原 因。\n细小核糖核酸病毒的自然成熟需要分解蛋白的3C酶。因此，抑 制这些分解蛋白的3C酶的活性代表了一种重要而且有用的治疗和治 愈该性质的病毒感染、包括普通感冒的方法。\n最近发现了一些细小核糖核酸病毒3c蛋白酶的酶活性的小分子 抑制剂(即抗细小核糖核酸病毒的化合物)。参见，例如美国专利申请 号08/850,398，由Webber等人于1997年5月2日递交；美国专利 申请号08/991,282，由Dragovich等人于1997年12月16日递交；和 美国专利申请号08/991,739，由Webber等人于1997年12月16日 递交。这些美国专利申请描述了某些抗细小核糖核酸病毒的化合物及 其合成方法，这些申请所公开的内容引入本文作为参考。\n最近，在由Dragovich等人于1998年8月28日递交的美国专利 申请号60/098,354(’354申请)中公开了一种特别有效的抗细小核 糖核酸病毒剂，该申请引入本文作为参考。该申请公开了一组通式I 的抗细小核糖核酸病毒剂。其中包括一种特别有前景的化合物， AG7088，该化合物对多种鼻病毒血清型显示极佳的抗病毒特性，目前 正在进行人类的临床试验。’354申请还公开了用于合成这些化合物 的方法和中间体。例如，其中的一般方法V公开了合成式I化合物的 一般方法，该方法包括将通式BB的羧酸与通式P的胺进行形成酰胺 的反应以得到最终的产物CC，如下所示。\n\n’354申请还公开了合成通式BB和P的中间体的方法，并教导了 进行上述形成酰胺的反应的方法。因此，’354申请教导了从羧酸 BB(在以下所述的通式II化合物的范围之内)和通式P的化合物(与以 下所述的通式III的化合物相同)合成通式I化合物的适宜方法。同 样，Dragovich等人最近的两份出版物也公开了抗细小核糖核酸病毒 剂及其适宜的合成方法。参见“不可逆的人鼻病毒3C蛋白酶抑制剂 的以结构为基础的设计、合成和生物学评价。3.含酮基亚甲基的肽 模拟物的结构活性研究”，Dragovich等，Journal of Medicinal Chemistry，ASAP，1999；和“不可逆的人鼻病毒3C蛋白酶抑制剂 的以结构为基础的设计、合成和生物学评价。4.掺入P1内酰胺部分 作为L-谷酰胺的替代物”，Dragovich等，Journal of Medicinal Chemistry，ASAP，1999。上述文章全文引入本文作为参考。\n但是，仍需要开发用于合成抗细小核糖核酸病毒剂的改进的、更 有效的方法和新的中间体。具体地讲，需要改进的合成通式II和III 化合物的方法。\n发明概述：\n本发明涉及制备式I的抗细小核糖核酸病毒剂、例如化合物 AG7088的经济、有效的方法以及用于该合成方法的中间体。\n式I的抗细小核糖核酸病毒剂包括：\n\n其中R1是H、F、烷基、OH、SH或O-烷基；\nR2和R3彼此独立地是H；\n或\n其中n是0至5的整数，A1是CH或N，A2和各A3彼此独立地选自 C(R41)(R41)、N(R41)、S、S(O)、S(O)2和O，A4是NH或NR41，其中各 R41彼此独立地是H或低级烷基，条件是在上述由A1、A2、(A3)n、A4 和C＝O形成的环中至多有两个连续的杂原子，并且R2和R3中至少有 一个是\n或\nR4是\n\nR5和R6彼此独立地是H、F、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳 基；\nR7和R8彼此独立地是H、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、 -OR17、-SR17、-NR17R18、-NR19NR17R18或-NR17OR18，其中R17、R18和 R19彼此独立地是H、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基或酰基， 条件是R7和R8中至少有一个是烷基、芳基、杂芳基、-OR17、-SR17、 -NR17R18、-NR19NR17R18或-NR17OR18；\nR9是含有1至3个选自O、N和S的杂原子的5元杂环；\nZ和Z1彼此独立地是H、F、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳 基、-C(O)R21、-CO2R21、CN、-C(O)NR21R22、-C(O)NR21OR22、-C(S)R21、 -C(S)NR21R22、-NO2、-SOR21、-SO2R21、-SO2NR21R22、-SO(NR21)(OR22)、 -SONR21、-SO3R21、-PO(OR21)2、-PO(R21)(R22)、-PO(NR21R22)(OR23)、 -PO(NR21R22)(NR23R24)、-C(O)NR21NR22R23或-C(S)NR21NR22R23，其中R21、 R22、R23和R24彼此独立地是H、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂 芳基、酰基或硫代酰基，或者其中R21、R22、R23和R24中的任意两个与 它们所结合的原子合在一起形成杂环烷基，条件是Z和Z1不同时为 H；\n或者Z1和R1与它们所结合的原子合在一起形成环烷基或杂环烷基， 其中Z1和R1如上所定义，但不包括不能形成环烷基或杂环烷基的部 分；\n或者Z和Z1与它们所结合的原子合在一起形成环烷基或杂环烷基，其 中Z和Z1如上所定义，但不包括不能形成环烷基或杂环烷基的部分。\n正如以下将要讨论的，这些式I的抗细小核糖核酸病毒剂可以通 过将通式II的化合物与通式III的化合物进行适当的形成酰胺的反 应来合成。本发明的方法不仅减少了合成式III化合物所需的步骤 数，而且更为重要的是，还采用了较为便宜的原料和试剂。\n通过阅读说明书，可以更全面地理解本发明的这些目的、优点和 特点。\n本发明优选实施方案的详细描述：\n在本申请中，使用了如下定义：\n根据本领域采用的规则，在本文的结构式中用 来表示所涉及 的部分或取代基与核心或骨架结构的连接点的键。\n当化学结构中包含手性碳时，若无指明具体取向，则同时包括两 种立体异构体形式。\n“烷基”是指碳原子和氢原子的直链或支链的一价饱和和/或不 饱和基团，例如甲基(Me)、乙基(Et)、丙基、异丙基、丁基(Bu)、异 丁基、叔丁基(t-Bu)、乙烯基、戊烯基、丁烯基、丙烯基、乙炔基、 丁炔基、丙炔基、戊炔基、己炔基等，这些基团可以是未取代的(即， 仅含碳和氢)或被一个或多个以下所定义的适宜取代基(例如，一个或 多个卤素，例如F、Cl、Br或I，优选F和Cl)所取代。“低级烷基” 是指在其链中含有1至4个碳原子的烷基。\n“环烷基”是指含有3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或 14个碳环原子的非芳香性的一价单环、二环或三环基团，该基团可 以是饱和或不饱和的，并且可以是未取代的或被一个或多个以下所定 义的适宜取代基所取代，并且该基团可与一个或多个杂环烷基、芳基 或杂芳基稠合，这些杂环烷基、芳基或杂芳基本身又可以是未取代的 或被一个或多个取代基所取代。环烷基的说明性的例子包括如下基 团：\n\n和\n“杂环烷基”是指含有3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、 14、15、16、17或18个环原子、其中包括1、2、3、4或5个选自 氮、氧和硫的杂原子的非芳香性的一价单环、二环或三环基团，该基 团可以是饱和或不饱和的，并且可以是未取代的或被一个或多个以下 所定义的适宜取代基所取代，并且该基团可与一个或多个环烷基、芳 基或杂芳基稠合，这些环烷基、芳基或杂芳基本身又可以是未取代的 或被一个或多个适宜的取代基所取代。杂环烷基的说明性的例子包括 如下基团：\n\n和\n“芳基”是指含有6、10、14或18个碳原子的芳香族一价单环、 二环或三环基团，该基团可以是来取代的或被一个或多个以下所定义 的适宜取代基所取代，并且该基团可与一个或多个环烷基、杂环烷基 或杂芳基稠合，这些环烷基、杂环烷基或杂芳基本身又可以是未取代 的或被一个或多个适宜的取代基所取代。芳基的说明性的例子包括如 下基团：\n和\n“杂芳基”是指含有4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、 15、16、17或18个环原子、其中包括1、2、3、4或5个选自氮、 氧和硫的杂原子的芳香性的一价单环、二环或三环基团，该基团可以 是未取代的或被一个或多个以下所定义的适宜取代基所取代，并且该 基团可与一个或多个环烷基、杂环烷基或芳基稠合，这些环烷基、杂 环烷基或芳基本身又可以是未取代的或被一个或多个适宜的取代基 所取代。杂芳基的说明性的例子包括如下基团：\n\n\n和\n“杂环”是指杂芳基或杂环烷基(如上所述，其均可以选择性地 被取代)。\n“酰基”是指-C(O)-R基团，其中R是以下所定义的取代基。\n“硫代酰基”是指-C(S)-R基团，其中R是以下所定义的取代基。\n“磺酰基”是指-SO2R基团，其中R是以下所定义的取代基。\n“羟基”是指基团-OH。\n“氨基”是指基团-NH2。\n“烷基氨基”是指基团-NHRa，其中Ra是烷基。\n“二烷基氨基”是指基团-NRaRb，其中Ra和Rb彼此独立地是烷基。\n“烷氧基”是指基团-ORa，其中Ra是烷基。烷氧基的例子包括甲 氧基、乙氧基、丙氧基等。\n“烷氧基羰基”是指基团-C(O)ORa，其中Ra是烷基。\n“烷基磺酰基”是指基团-SO2Ra，其中Ra是烷基。\n“烷基氨基羰基”是指基团-C(O)NHRa，其中Ra是烷基。\n“二烷基氨基羰基”是指基团-C(O)NRaRb，其中Ra和Rb彼此独立 地是烷基。\n“巯基”是指基团-SH。\n“烷硫基”是指基团-SRa，其中Ra是烷基。\n“羧基”是指基团-C(O)OH。\n“氨基甲酰基”是指基团-C(O)NH2。\n“芳氧基”是指基团-ORc，其中Rc是芳基。\n“杂芳氧基”是指基团-ORd，其中Rd是杂芳基。\n“芳硫基”是指基团-SRc，其中Rc是芳基。\n“杂芳硫基”是指基团-SRd，其中Rd是杂芳基。\n“离去基”(Lv)是指可以通过取代反应被置换的任何适宜的基 团。本领域普通技术人员可以理解，强酸的任何共轭碱均可以起到离 去基的作用。适宜离去基的说明性的例子包括但不仅限于，-F、-Cl、 -Br、烷基氯化物、烷基溴化物、烷基碘化物、烷基磺酸酯、烷基苯 磺酸酯、烷基对甲苯磺酸酯、烷基甲磺酸酯、三氟甲磺酸酯，以及含 有硫酸氢根、硫酸甲酯或磺酸根离子的任何基团。\n典型的保护基、试剂和溶剂，例如但不仅限于下表1中所列的那 些，在文中和权利要求中采用如下缩写。本领域技术人员可以理解， 表中所列的化合物可以互换使用；例如，在“试剂和溶剂”下所列的 化合物可以用作保护基等。此外，其它可能的保护基、试剂和溶剂是 本领域技术人员已知的；这些均包括在本发明的范围内。\n表1\n                           保护基\nAda                        金刚烷乙酰基\nAlloc                      烯丙氧羰基\nAllyl                      烯丙基酯\nBoc                        叔丁氧羰基\nBzl                        苄基\nCbz                        苄氧羰基\nFmoc                       芴基甲氧羰基\nOBzl                       苄酯\nOEt                        乙酯\nOMe                        甲酯\nTos(Tosyl)                 对甲苯磺酰基\nTrt                        三苯基甲基\n                           试剂和溶剂\nACN                        乙腈\nAcOH                      乙酸\nAc.sub.2 0                乙酸酐\nAdacOH                    金刚烷乙酸\nAIBN                      2，2-偶氮二异丁腈\nAlloc-Cl                  烯丙氧基羰酰氯\nBHT                       2，6-二-叔丁基-4-甲基苯酚\nBoc.sub.2 0               二碳酸二叔丁酯\nCDI                       1，1’-羰基二咪唑\nDIEA                      二异丙基乙基胺\nDIPEA                     N，N-二异丙基乙基胺\nDMA                       二甲基乙酰胺\nDMF                       N，N-二甲基甲酰胺\nDMSO                      二甲亚砜\nEDTA                      乙二胺四乙酸\nEt.sub.3N                 三乙胺\nEtOAc                     乙酸乙酯\nFDH                       甲酸脱氢酶\nFmocOSu                   9-芴基甲氧基羰基N-羟基琥珀酰亚胺酯\nHATU                      N-[(二甲基氨基)-1H-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡\n                          啶基亚甲基]-N-甲基甲铵六氟磷酸盐N-氧化物\nHOBT                      1-羟基苯并三唑\nHF                        氢氟酸\nLDH                       乳酸脱氢酶\nLiHMDS                    双三甲基硅烷基氨基锂\nMeOH                      甲醇\nMes(Mesyl)                甲磺酰基\nMTBE                      叔丁基甲基醚\nNAD                       烟酰胺腺嘌呤二核苷酸\nNADH                      过氧化氢氧化还原酶\nNaHMDS                    双三甲基硅烷基氨基钠\nNMP                       1-甲基-2-吡咯烷酮\nnin.                      茚三酮\ni-PrOH                      异丙醇\nPip                         哌啶\nPPL                         脂酶\npTSA                        对甲苯磺酸一水合物\nPyr                         吡啶\nTEA                         三乙胺\nTET                         三亚乙基四胺\nTFA                         三氟乙酸\nTHF                         四氢呋喃\nTriflate(Tf)                三氟甲磺酰基\n术语“适宜的有机部分”是指本领域技术人员可以通过例如常规 的试验来判断的、不会对本发明化合物的抑制活性产生不利影响的任 何有机部分。适宜的有机部分的说明性的例子包括但不仅限于，羟 基、烷基、氧代基团、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、酰基、磺 酰基、巯基、烷硫基、烷氧基、羧基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、 氨基甲酰基、芳硫基、杂芳硫基等。\n术语“取代基”或“适宜的取代基”指本领域技术人员可以通过 例如常规的试验来判断的任何适宜的取代基。适宜取代基的说明性的 例子包括羟基、卤素、氧代基团、烷基、酰基、磺酰基、巯基、烷硫 基、烷氧基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、羧基、氨基、烷基 氨基、二烷基氨基、氨基甲酰基、芳氧基、杂芳氧基、芳硫基、杂芳 硫基等。\n术语“选择性取代的”用来表示指定的基团是未取代的或被一个 或多个适宜的取代基所取代，如果对选择性的取代基进行了明确指 定，则该术语表示该基团是未取代的或被指定的取代基所取代的。正 如以上所定义的，各基团均可以是未取代或取代的(即，它们是选择 性取代的)，除非另有说明(例如，指明该基团是未取代的)。\n“前药”是指可以在生理条件下或通过溶剂分解或代谢转化成具 有药物活性的特定化合物的化合物。\n“药物活性代谢物”是指通过代谢在体内产生的特定化合物的药 理学活性产物。\n“溶剂化物”是指指定化合物的可药用溶剂化物，其保留了该化 合物的生物学效力。溶剂化合物的例子包括本发明化合物与水、异丙 醇、乙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸或乙醇胺的结合物。\n“可药用盐”是指保留了指定化合物的游离酸或碱的生物学效力 并且在生物学或其它方面没有不利影响的盐。可药用盐的例子包括硫 酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、磷酸 一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢 碘酸盐、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异 丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙炔酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、 辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、丁炔-1，4-二酸盐、己 炔-1，6-二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯 甲酸盐、羟基苯甲酸盐、甲氧基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、磺酸盐、 二甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、苯丙酸盐、苯丁酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、 γ-羟基丁酸盐、乙醇酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、丙磺酸盐、萘-1- 磺酸盐、萘-2-磺酸盐和扁桃酸盐。\n本发明还提供了包括本申请中所列的合成步骤之一的合成方 法。当一个合成步骤至少是最终合成方法的一部分时，则合成方法包 含了该合成步骤。因此，合成方法可以仅有一个合成步骤，或者还含 有与之有关的附加合成步骤。该合成方法可以含有很少的附加合成步 骤，或者可以含有很多附加的合成步骤。\n如果由本发明的方法制得的式I的抗细小核糖核酸病毒剂是 碱，则可以通过本领域已知的任何适宜方法制备所需的盐，包括将游 离碱用无机酸例如盐酸；氢溴酸；硫酸；硝酸；磷酸等处理，或用有 机酸例如乙酸；马来酸；琥珀酸；扁桃酸；富马酸；丙二酸；丙酮 酸；草酸；乙醇酸；水杨酸；吡喃糖基酸，例如葡糖醛酸或半乳糖醛 酸；α-羟基酸，例如柠檬酸或酒石酸；氨基酸，例如天冬氨酸或谷 氨酸；芳香族酸，例如苯甲酸或肉桂酸；磺酸，例如对甲苯磺酸或乙 磺酸等处理。\n如果由本发明的方法制得的式I的抗细小核糖核酸病毒剂是 酸，则可以通过本领域已知的任何适宜方法制备所需的盐，包括将游 离酸用无机或有机碱例如胺(伯、仲或叔)；碱金属或碱土金属氢氧化 物等处理。适宜的盐的说明性的例子包括从氨基酸例如甘氨酸和精氨 酸；氨；伯、仲和叔胺以及和环状的胺例如哌啶、吗啉和哌嗪衍生的 有机盐；以及从钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂衍生的无 机盐。\n当化合物、其盐或溶剂化物是固体时，本领域技术人员可以理 解，本发明的方法中所用的式I化合物以及中间体、其盐和溶剂化物 可以以不同的晶型存在，所有这些均包括在本发明和指定的分子式的 范围内。\n式I的抗细小核糖核酸病毒剂以及本发明的方法中所用的中间 体可以以单个的立体异构体、消旋体和/或旋光对映体的混合物和/ 或非对映体的形式存在。所有这些单个的立体异构体、消旋体及其混 合物均包括在本发明的范围内。但是，优选本发明的方法中所用的中 间体化合物是光学纯的形式。\n本领域技术人员通常可以理解，光学纯的化合物是对映体纯的化 合物。本文所用的术语“光学纯”是指化合物含有至少足够量的单个 对映体以得到具有所需的药理学活性的化合物。优选“光学纯”是指 化合物含有至少90％的单个异构体(80％对映体过量(以下称为 “e.e.”))，更优选至少95％(90％e.e.)，仍更优选至少97.5％(95％ e.e.)，首选至少99％(98％e.e.)。优选由本发明的方法形成的式I 的抗细小核糖核酸病毒剂是光学纯的。\n本发明涉及制备式I的抗细小核糖核酸病毒剂的方法：\n\n其中R1是H、F、烷基、OH、SH或O-烷基；\nR2和R3彼此独立地是H；\n或\n其中n是0至5的整数，A1是CH或N，A2和各A3彼此独立地选自 C(R41)(R41)、N(R41)、S、S(O)、S(O)2和O，A4是NH或NR41，其中各 R41彼此独立地是H或低级烷基，条件是在上述由A1、A2、(A3)n、A4 和C＝O形成的环中至多有两个连续的杂原子，并且R2和R3中至少有 一个是\n或\nR4是\n\nR5和R6彼此独立地是H、F、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳 基；\nR7和R8彼此独立地是H、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、 -OR17、-SR17、-NR17R18、-NR19NR17R18或-NR17OR18，其中R17、R18和 R19彼此独立地是H、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基或酰基， 条件是R7和R8中至少有一个是烷基、芳基、杂芳基、-OR17、-SR17、 -NR17R18、-NR19NR17R18或-NR17OR18；\nR9是含有1至3个选自O、N和S的杂原子的5元杂环；\nZ和Z1彼此独立地是H、F、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳 基、-C(O)R21、-CO2R21、CN、-C(O)NR21R22、-C(O)NR21OR22、-C(S)R21、 -C(S)NR21R22、-NO2、-SOR21、-SO2R2R21、-SO2NR21R22、-SO(NR21)(OR22)、 -SONR21、-SO3R21、-PO(OR21)2、-PO(R21)(R22)、-PO(NR21R22)(OR23)、 -PO(NR21R22)(NR23R24)、-C(O)NR21NR22R23或-C(S)NR21NR22R23，其中R21、 R22、R23和R24彼此独立地是H、烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂 芳基、酰基或硫代酰基，或者其中R21、R22、R23和R24中的任意两个与 它们所结合的原子合在一起形成杂环烷基，条件是Z和Z1不同时为 H；\n或者Z1和R1与它们所结合的原子合在一起形成环烷基或杂环烷基， 其中Z1和R1如上所定义，但不包括不能形成环烷基或杂环烷基的部 分；\n或者Z和Z1与它们所结合的原子合在一起形成环烷基或杂环烷基，其 中Z和Z1如上所定义，但不包括不能形成环烷基或杂环烷基的部分。\n本发明公开了式I化合物可以通过将式II化合物和式III化合 物进行形成酰胺的反应来制备：\n\n形成酰胺的反应可以通过任何适宜的方法、试剂和反应条件来完 成。优选可以采用’354申请中所公开的各种方法。例如，可将式II 化合物与式III化合物在HATU、DIPEA、CH3CN和H2O的存在下反应 生成所需的式I化合物。可以采用任何适宜的纯化方法来进一步纯化 式I化合物。\n更优选通过包括如下步骤的酰胺形成反应来制备式I化合物：\n(a)将式II化合物与式IIIA化合物在N-甲基吗啉的存在下反应形 成反应混合物；然后\n\n(b)向反应混合物中加入式Lv-X的化合物形成式I化合物，其中X 是任何适宜的卤化物。\n优选地，采用更优选的酰胺形成反应的制备式I化合物的方法， 采用以下公开的某些或全部试剂和反应条件。因此，优选将式II化 合物和式IIIA化合物在任何适宜的容器中在DMF中混合。适宜的容 器优选是单颈烧瓶，然后将其用任何适宜的隔膜覆盖并用温度探针覆 盖。在向反应混合物中加入N-甲基吗啉之前，用氮气将适宜的容器 净化。更优选将N-甲基吗啉通过注射器一次性加入并将反应混合物 冷却至约-5℃至5℃。更优选将反应混合物冷却至约0℃。然后向反 应混合物中加入式Lv-X化合物的溶液。更优选式Lv-X化合物的溶液 是式Lv-X化合物的DMF溶液。仍更优选式Lv-X化合物是CDMT。将 式Lv-X化合物的溶液通过任何适宜的方法加入到反应混合物中以使 反应混合物保持在恒定的温度。例如，可以将式Lv-X化合物的溶液 用注射器滴加到反应混合物中。在式Lv-X化合物加料结束后，将反 应混合物升温至约室温。通过薄层色谱(以下称为”TLC)监测式II 化合物的消失来监测反应的进程。当反应至少是基本结束时，可以通 过向反应混合物中缓慢加入水形成浆液使式I化合物从溶液中析出 沉淀。然后可以通过本领域技术人员已知的任何适宜方法从浆液中分 离出式I化合物。例如，可以通过过滤从浆液中分离出式I化合物。 可以采用本领域技术人员已知的任何适宜的纯化方法来纯化式I化 合物。更优选将式I化合物通过重结晶进行纯化。\n本发明还公开了合成式III化合物及其酸加成盐的两种方法。在 这两种方法中，第二种方法是目前优选的方法，因为该方法在工业规 模上可以产生更大的成本有效性。\n在这两种方法中，第一种方法是从式V化合物制备式IV化合物 及其酸加成盐。\n\n本领域技术人员可以看出，式IV化合物是式III化合物的亚属。\n式V化合物可以从市售的N-Boc L谷氨酸γ-苄酯制备。可以采用 任何适宜的方法来制备式V化合物。优选采用美国专利申请号 08/991,739中公开的方法。美国专利申请号08/991,739全文引入本 文作为参考。\n本发明的方法包括如下步骤：\n(a)将式V化合物用双(三甲基硅烷基)氨基化物和溴乙腈进行氰基甲 基化生成式VI化合物；\n\n(b)将式VI化合物依次进行还原、环化和脱保护生成式VII化合物； 然后\n\n(c)通过将化合物与SO3-吡啶复合物反应将式VII化合物氧化和烯化 生成反应混合物，然后将反应混合物与式VIII的正膦反应。\n\n如上所述，根据本发明，从N-Boc谷氨酸γ-苄酯制备式V化合物 可以通过本领域已知的任何适宜的方法来进行。\n此外，式V化合物的氰基甲基化可以用任何适宜的方法、试剂和 反应条件来完成。优选以下所公开的方法并且使用全部或某些试剂或 反应条件。因此，优选将式V化合物在氮气氛下用至少5个小时的时 间于-70℃下滴加到搅拌中的NaHMDS的THF溶液中，然后与溴乙腈混 合。\n按照该方法将式V化合物用双(三甲基硅烷基)氨基化物和溴乙 腈氰基甲基化可以以5∶1的比例生成式VI化合物及其差向异构体。 但是，该化合物可以通过任何适宜的方法纯化。优选将式VI化合物 通过过滤然后在研磨后进行色谱分离来纯化。在这些优选的条件下， 可以以60％的总收率得到非对映体纯度＞99％的式VI化合物。\n将式VI化合物转化成式VII化合物的步骤(b)的三步还原、环化 和脱保护反应可以用任何适宜的试剂和反应条件来完成。优选采用以 下公开的方法，使用全部或某些试剂和反应条件。因此，优选通过向 式VI化合物的四氢呋喃/甲醇溶液中加入氯化钴(II)六水合物将式 VI化合物还原。将所得溶液冷却至0℃，然后在至少7小时的时间内 分批加入硼氢化钠。然后向粗产物的甲醇溶液中加入对甲苯磺酸一水 合物并在室温下反应至少约18小时。除去溶剂后，将残余物溶于乙 酸乙酯并洗涤。可以使用任何适宜的洗涤试剂。优选的洗涤试剂是饱 和碳酸氢钠。然后向粗产物中加入甲醇的水溶液。更优选使用2.5％ 的甲醇溶液。可以通过任何适宜的方法从溶液中分离出粗产物。例 如，可以通过过滤并将滤液在旋转蒸发仪上浓缩分离出粗产物。然后 将产物溶于乙酸乙酯，干燥，过滤然后浓缩得到式VII化合物的粗 品。更优选将产物用硫酸镁干燥。粗品式VII化合物可以通过任何适 宜的纯化方法进一步纯化。更优选将式VII的粗品化合物通过用1∶1 乙酸乙酯和己烷研磨进行纯化。\n如果采用以上公开的优选的三步还原、环化和脱保护反应，可以 以至少约95％的总收率得到纯净的式VII化合物。\n在采用SO3-吡啶复合物和式VIII的正膦将式VIII化合物氧化和 烯化生成式IV的反应中，可以采用任何适宜的方法、试剂和反应条 件。优选采用以下公开的方法和全部或某些试剂和反应条件。因此， 优选将三乙胺加入到式VIII化合物和甲基亚砜的溶液中。将所得溶 液冷却至约5℃，然后加入三氧化硫-吡啶复合物。将反应液于大约5 ℃下搅拌至少约15分钟。移走用于将溶液冷却至约5℃的冷却浴后， 将反应液继续搅拌至少约1小时。然后加入(乙氧羰基亚甲基三苯 基)-正膦并将反应混合物在室温下搅拌至少约3小时。然后，用乙酸 乙酯终止反应并萃取。更优选通过加入饱和盐水终止反应。然后将合 并的有机相洗涤，干燥，过滤然后浓缩得到粗品式IV化合物。更优 选将合并的有机相用饱和盐水洗涤然后用硫酸镁干燥。\n可将式IV化合物通过任何适宜的方法进行纯化。优选采用色谱 纯化和研磨的方法。如果采用优选的纯化方法，可以达到55％至60％ 的收率。\n本发明所公开的制备式IV化合物及其酸加成盐的第二种方法包 括如下步骤：\n(a)将式IX化合物用溴乙腈进行双阴离子烷基化反应生成式X化合 物；\n\n(b)将式X化合物氢化生成式XI的胺；\n\n(c)将式XI的胺与Et3N反应生成式XII的内酰胺酯；\n\n(d)将式XII的内酰胺酯通过适宜的还原方法还原生成式XIII的化 合物；\n\n(e)通过将式XIII化合物与式XV化合物反应将其氧化和烯化，生成 式XIV化合物；然后\n\n(f)将式XIV化合物转化成式IV化合物。\n此外，本领域技术人员可以理解，以上公开的方法可用于制备式 XIV化合物。具体地讲，步骤(a)-(e)公开了制备式XIV化合物的方 法。\n式IX化合物可以通过本领域已知的任何适宜方法进行制备。例 如，N-Boc L-(+)-谷氨酸二甲酯可以从市售的L-谷氨酸二甲酯盐酸 盐或市售的L-谷氨酸5-甲酯按照文献中的方法制备。参见，例如 Shimamoto等，J.Org.Chem.1991，56，4167和Duralski等， Tetrahedron Lett.1998，30，3585。这些参考文献全文引入本文 作为参考。\n优选地，双阴离子烷基化反应采用以下公开的方法和全部或某些 试剂和反应条件进行制备。因此，优选将式IX化合物首先溶于THF 形成溶液，然后将其在氩气氛下于-78℃滴加到搅拌中的LiHMDS的溶 液中。将所得混合物于大约-78℃下搅拌2小时，然后在1小时内滴 加新蒸馏的溴乙腈。将反应混合物于大约-78℃下继续搅拌2小时。 然后终止反应。更优选通过加入0.5M HCl和H2O终止反应。分出所 形成的水层并用甲基叔丁基醚进一步萃取。将合并的有机萃取液洗 涤，干燥然后过滤。更优选将有机萃取液用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤 然后用硫酸镁干燥。减压蒸除溶剂。\n式IX化合物可以通过本领域已知的任何适宜方法氢化成式XI的 胺。优选在5％Pd/C的存在下进行氢化反应。更优选按照以下公开的 使用某些或全部试剂和反应条件的方法进行氢化反应。根据该优选的 氢化方法，将式IX化合物溶于HOAc并和5％Pd/C一起在50psi的 氢气压力下振摇3天。然后将混合物用硅藻土过滤。然后可以将滤液 减压蒸发并将残余物反复从甲基叔丁基醚中蒸发。\n式XI的胺与Et3N的反应可以用任何适宜的条件来完成。优选采 用以下公开的方法和全部或某些试剂和反应条件。因此，优选将式XI 的胺溶于1∶1 MeOH/THF混合物，然后向溶液中加入Et3N。将所得 混合物于大约45℃下搅拌约10小时或者直至原料消失。可以通过1H NMR监测原料的存在。蒸除溶剂后，加入甲基叔丁基醚。然后滤出沉 淀。向用水稀释的滤液中加入0.5M HCl。分相后，将水相用乙酸乙 酯萃取。将合并的有机相洗涤，干燥，过滤然后浓缩。更优选将合并 的有机相用盐水洗涤然后用硫酸镁干燥。可将有机相在旋转蒸发仪上 浓缩。经快速色谱分离得到式XII的内酰胺酯。\n可以采用任何适宜的还原方法将式XII的内酰胺酯转化成式 XIII化合物。优选使用LiBH4作为还原剂。更优选采用以下公开的方 法或该方法的一部分，以及任何或全部试剂和反应条件。因此，更优 选地，将LiBH4加入到搅拌中的式XII内酰胺酯的THF溶液中。将LiBH4分数次在氩气氛下于0℃加入。将反应混合物于0℃搅拌10分钟，然 后升温至室温并继续搅拌2小时。然后终止反应。更优选通过在冰浴 冷却下滴加0.5M HCl来终止反应。将溶液用乙酸乙酯和H2O稀释。 相分离后，可将水相用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层洗涤，干燥， 过滤然后浓缩。更优选将合并的有机相用盐水洗涤并用硫酸镁干燥。 可将有机相在旋转蒸发仪上浓缩。快速色谱分离得到式XII化合物。\n可以采用任何适宜的氧化和烯化方法从式XIII化合物制备式 XIV化合物。优选采用以下公开的方法或该方法的一部分，以及全部 或某些试剂和反应条件。因此，根据本发明，将苯甲酸、(乙氧羰基 亚甲基三苯基)正膦和DMSO加入到式XIII化合物的二氯甲烷溶液 中。向该溶液中分数次加入Dess-Martin periodinane，然后将反应 混合物在室温下搅拌至少5小时直至式XIII化合物基本消失。可以 通过1H NMR监测式XIII化合物的存在。加入饱和碳酸氢钠溶液，然 后将混合物搅拌30分钟生成沉淀。滤出沉淀，然后将滤液的有机相 分离，洗涤然后浓缩得到粗品式XIV化合物。更优选将滤液用盐水洗 涤然后在旋转蒸发仪上浓缩。可以采用任何适宜的方法纯化粗品式 XIV化合物。更优选将粗品式XIV化合物通过快速色谱纯化然后溶于 乙酸乙酯。然后逐渐向搅拌的溶液中加入过量的己烷生成沉淀。滤出 沉淀然后干燥得到式XIV化合物。更优选将沉淀在真空烘箱中干燥至 少约12小时。\n提供以下实施例仅仅是为了说明本发明，不应将其看作是对所附 权利要求所定义的本发明保护范围的限定。\n实施例：\n以下说明了用于制备式I化合物的属于式II和式III范围内的 两种化合物之间的酰胺形成反应的实施例。具体地讲，以下反应方案 1中所描述的实施例说明了用于制备蛋白酶抑制剂AG7088的1和2 之间的反应。\n                     反应方案1\n\n以下实施例公开了包括在式IV化合物范围之内的化合物1的制 备。第一个实施例(如以下反应方案2中所示)说明了以上公开的使用 氰基甲基化反应的路线。第二个实施例(如以下反应方案3中所示) 说明了用于制备同样化合物的第二种更优选的经济上有效的路线。\n                    反应方案2\n\n                    反应方案3\n\n4的制备(反应方案2)\n将3(1.0kg，2.34mol，1.0当量)的THF(8.0L)溶液用5小时 的时间在氮气氛下于-70℃滴加到搅拌中的NaHMDS的THF溶液(1M的 THF溶液，2.96L，1.28当量)中。将所得溶液于-70℃搅拌0.5小时， 然后用25分钟的时间滴加新蒸馏的溴乙腈(320mL，2.0当量)。将反 应混合物于-70℃继续搅拌1小时直至原料3消失。加入饱和氯化铵 溶液(7.0L)终止反应，用甲基叔丁基醚(24L)萃取。将有机相用盐水 (3×6.0L)洗涤。减压蒸除溶剂得到深棕色的油(1.5kg)。将该粗产物 溶于二氯甲烷(8.0L)然后通过硅胶(600g)和活性碳(250g)的床。将 滤饼用二氯甲烷(4.0L)漂洗后，将滤液在旋转蒸发仪上浓缩得到浅棕 色的油(1.28Kg)，然后将其溶于乙酸乙酯(2.5L)。在剧烈搅拌下向形 成的溶液中加入过量的己烷(14.5L)，在30分钟内有白色固体析出。 将该浆液用冰水浴冷却并搅拌4.5小时，然后过滤得到浅棕色固体状 的4(662g，60％)：1H NMR(CDCl3)δ1.46(s，3H)，1.49(s，9H)， 1.59(s，3H)，1.75-1.95(m，1H)，2.15-2.31(m，1H)，2.55- 3.15(m，3H)，3.36(d，J＝10.8Hz，1H)，3.62-4.10(m，3H)， 4.13-4.32(m，3H)，4.70(m，1H)，7.15-7.42(m，5H)。\n6的制备(反应方案3)\n化合物6从L-谷氨酸二甲酯盐酸盐(可从Lancaster购买到)或 L-谷氨酸5-甲酯(可从Aldrich购买到)按照文献中的方法制备。\n7的制备(反应方案3)\n将N-Boc L-(+)-谷氨酸二甲酯(6，10g，36.3mmol，1当量)的 THF(100mL)溶液于-78℃及氩气氛下滴加到搅拌中的LiHMDS溶液 (77mL，1M的THF溶液，77.0mmol，2.1当量)中。将形成的深色混 合物于-78℃搅拌2小时，然后用1小时的时间滴加新蒸馏的溴乙腈 (13.1g，109.0mmol，3当量)。将反应混合物于-78℃继续搅拌2小 时，并通过TLC分析证实原料(6)的消失。加入HCl(120mL，0.5M) 和H2O(200mL)终止反应。分层，将水层用甲基叔丁基醚萃取(3× 200mL)。将合并的有机萃取液用饱和碳酸氢钠(2×250mL)和盐水(2 ×250mL)洗涤，用硫酸镁干燥然后过滤。减压蒸除溶剂得到棕色的油 (15.2g)。经快速硅胶色谱(3∶1己烷/乙酸乙酯)得到无色的油(7， 6.67g，10.8mmol，58％)：1H NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)，2.12-2.24 (m，2H)，2.77-2.82(m，2H)，2.85-2.91(m，1H)，3.78(s，3H)， 3.79(s，3H)，4.32-4.49(m，1H)，5.13(d，J＝6.0Hz，1H)；13C NMR(CDCl3)δ19.4，28.6，34.3，38.6，49.8，53.1，80.9，117.5， 155.9，172.4，172.8；HRMS m/z 314.1481(C12H22N2O4的计算值， 314.1486)。\n8的制备(反应方案3)\n将化合物7(4.60g，14.6mmol)溶于HOAc(120mL)并和5％Pd/C(20g)一起在氢气氛(50psi)下振摇3天。将混合物用硅藻土过滤。 将滤液减压蒸发并将残余物反复从甲基叔丁基醚中蒸发得到浅粉红 色固体(8，8.32g)，将其直接用于随后的步骤。1H NMR(CD3OD)δ1.47 (s，9H)，1.85-2.10(m，4H)，2.60-2.62(m，1H)，2.92-2.96(m， 2H)，3.74(s，3H)，3.77(s，3H)，4.22-4.26(m，1H)；注：实 验证实，不到5％的Pd/C就可以使反应完全，即1g的5％Pd/C就可 以有效地将2g的7还原。\n9的制备(反应方案3)\n将粗品8溶于1∶1 MeOH/THF(40mL)并向溶液中加入Et3N (7mL)。将形成的混合物于45℃搅拌10小时直至通过1H NMR监测到 原料消失。在旋转蒸发仪上蒸除溶剂后，加入甲基叔丁基醚(200mL)， 有白色固体析出。过滤除去固体沉淀。将滤液用200mL H2O稀释，然 后加入0.5M HCl(5mL)。相分离，将水相用乙酸乙酯(4×200mL) 萃取。将合并的有机相用盐水(2×700mL)洗涤，用硫酸镁干燥，过 滤然后在旋转蒸发仪上浓缩得到浅棕色的油。经快速色谱得到白色固 体(9，2.5g，8.74mmol，60％)：1H NMR(CDCl3)δ1.37(s，9H)， 1.75-1.80(m，2H)，2.04-2.09(m，1H)，2.39-2.42(m，2H)， 3.25-3.29(m，2H)，3.67(s，3H)，4.23-4.26(m，1H)，5.47(d， J＝8.0Hz，1H)，6.29(s，1H)；13C NMR(CDCl3)δ28.5，28.6，34.5， 38.5，40.7，52.7，52.8，80.3，156.1，173.3，180.0；HRMS m/z 286.1564(C13H22N2O5的计算值，286.1587)。\n从4制备5(反应方案2)\n向4(400g，0.85mol，1当量)的四氢呋喃(3.0L)溶液中加入氯 化钴(II)六水合物(200g，0.85mol，1当量)的甲醇(3.0L)溶液。将 所得溶液冷却至0℃并在7小时的时间内分批加入硼氢化钠(130g， 3.51mol，4.4当量)。将反应混合物升温至室温并搅拌20小时，同 时用TLC监测原料(4)是否消失。将反应液冷却至0℃并通过加入1.0M HCl(14L)和乙酸乙酯(12L)终止反应。分相并向水相中加入2.0kg 氯化钠和4.0L乙酸乙酯。分相，将有机相合并，用盐水(1×3.0L) 洗涤，在旋转蒸发仪上浓缩得到粗品物质(440g)，将其直接用于随后 的水解反应。向粗品物质(440g，1当量)的甲醇(800mL)溶液中加入 对甲苯磺酸一水合物(4.0g，0.015当量)。将反应液室温搅拌过夜。 在旋转蒸发仪上蒸除溶剂并将残余物溶于乙酸乙酯(2.0L)，用饱和碳 酸氢钠(2×100mL)洗涤。将合并的水相用乙酸乙酯(2×200mL)萃 取。合并所有的有机相，在旋转蒸发仪上浓缩得到275g粗产物，向 其中加入2.5％甲醇(20mL)的(780mL)溶液并室温搅拌过夜。过滤除去 颗粒状的固体(手性辅剂)然后将滤液在旋转蒸发仪上浓缩。将残余物 溶于乙酸乙酯(1.5L)，用硫酸镁干燥，过滤然后浓缩得到粘稠的油。 将该油通过用1∶1乙酸乙酯(1L)和己烷(1L)研磨得到白色固体状5 (104g，从4的总收率为47％)。\n从9制备5(反应方案3)\n0℃及氩气氛下，向搅拌中的9(1.75g，6.10mmol)的THF(40mL) 溶液中分数次加入LiBH4(270mg，12.2mmol，2当量)。将反应混合 物于0℃搅拌10分钟，然后升温至室温并继续搅拌2小时。通过在 冰浴冷却下滴加0.5M HCl(24mL)终止反应(注：观察到有气体生 成)。将溶液用乙酸乙酯(100mL)和H2O(50mL)稀释。分相，将水层 用乙酸乙酯(6×150mL)萃取。将合并的有机相用硫酸镁干燥，过滤 然后在旋转蒸发仪上浓缩得到浅棕色的油。经快速色谱得到白色固体 (5，1.308g，5.06mmol，83％)：1H NMR(CDCl3)δ1.46(s，9H)， 1.61-1.67(m，1H)，1.82-1.91(m，1H)，1.94-2，00(m，1H)， 2.43-2.48(m，1H)，2.49-2.55(m，1H)，3.32-3.34(m，3H)， 3.58-3.66(m，2H)，3.68-3.79(m，2H)，5.47(d，J＝7.0Hz，1H)， 6.24(s，1H)；13C NMR(CDCl3)δ28.8，32.9，38.4，40.8，51.5， 66.3，79.8，157.0，181.3；HRMS m/z 258.1652(C13H22N2O5的计算 值，258.1650)。\n从5制备1\n方法A(反应方案2)\n向5(50.0g，0.184mol，1当量)的甲基亚砜(500mL)溶液中加 入三乙胺(116mL)。将所得溶液用冰浴冷却至5℃，然后加入三氧化 硫-吡啶复合物(132g)。将反应液在该温度下搅拌15分钟。移走冷却 浴，将反应液继续搅拌1小时。一次性加入(乙氧羰基亚甲基三苯基)- 正膦(112g)并将反应液室温搅拌3小时。通过加入饱和盐水(3.0L) 终止反应，用乙酸乙酯(3×1.5L)萃取。将合并的有机相用饱和盐水 (3×1.5L)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤然后浓缩得到深红色的油。将 该油通过色谱法纯化，然后用乙酸乙酯(60mL)和过量的己烷(240mL) 研磨。得到白色固体状的1(36.0g，60％)。\n方法B(反应方案3)\n向5(1.0g，3.87mmol，1当量)的二氯甲烷(80mL)溶液中加入 苯甲酸(1.89g，15.5mmol，4当量)、(乙氧羰基亚甲基三苯基)正膦 (5.39g，15.5mmol，4当量)和DMSO(4.8mL)。向该溶液中分数次加 入Dess-Martin periodinane(4.1g，9.17mmol，2.5当量)，然后 将反应混合物室温搅拌5小时直至原料5消失。加入饱和碳酸氢钠， 将该混合物搅拌30分钟。有白色固体析出，滤出该固体。将滤液的 有机相分离，用盐水(250mL)洗涤然后在旋转蒸发仪上浓缩得棕色的 油，将其通过快速色谱纯化得到浅棕色的泡沫(0.956g)。将该泡沫溶 于乙酸乙酯(3mL)。向搅拌的溶液中逐渐加入过量的己烷(12mL)，有 白色固体析出。将该固体过滤然后在真空烘箱中干燥过夜得到1 (0.69g，2.11mmol，55％)。手性HPLC：97％纯，98％de和100％E异 构体；1H NMR(CDCl3)δ1.22(t，J＝7.2Hz，3H)，1.38(s，9H)， 1.53-1.58(m，1H)，1.66-1.84(m，1H)，1.85-2.00(m，1H)， 2.30-2.50(m，2H)，3.20-3.37(m，2H)，4.13(q，J＝7.2Hz，2H)， 4.20-4.35(m，1H)，5.13(d，J＝7.5Hz，1H)，5.68(s，1H)，5.90 (dd，J＝1.8，15.6Hz，1H)，6.80(dd，J＝5.1，15.6Hz，1H)； HRMS m/z 326.1846(C16H26N2O6的计算值，326.1840)。\n从1和2制备AG7088(反应方案1)。\n将751mg化合物1在单颈圆底烧瓶中溶于DCM(10mL/g的1)然 后用隔膜覆盖。然后将烧瓶用氮气净化，然后在将溶液搅拌的同时通 过注射器加入1.4mL TFA。用5％MeOH的DCM溶液通过TLC监测反应 的进程，直至约4小时后原料消失。在压力＜50mTorr@45℃下真空蒸 除溶剂和过量的TFA。将产物化合物1A立即用于下述步骤。\n将化合物1A和2在覆盖有隔膜并且装有温度探针的单颈圆底烧 瓶中溶于DMF(7mL/g的2)。将烧瓶用氮气净化。将所得溶液分成两 份。通过注射器向第一份中加入1.6mL N-甲基吗啉然后冷却至0℃±5 ℃。在第二份溶液中溶解281mg CDMT。然后将该CDMT溶液通过注射 器滴加到第一份溶液中，保持反应温度为0℃±5℃。然后将所得反应 混合物升温至室温。通过TLC(7∶3∶1己烷∶EtOAc∶IPA)监测反 应约1小时直至化合物2消失。反应结束后，通过向反应混合物中缓 慢加入水使产物AG7088从溶液中析出。将形成的浆液过滤得到＞85％ 的化合物AG7088的白色颗粒状结晶，纯度＞97％。然后可将该产物通 过溶于热的MeOH∶EtOAc 1∶1中然后缓慢加入己烷(2体积)进行重 结晶。\n应当理解，以上描述是用于示范和解释的，其目的是为了说明本 发明及其优选的实施方案。通过常规的实验，本领域技术人员可确认 出可以进行的不背离本发明精神的明显的修饰和改变。因此，本发明 不是由以上说明书而是由下列权利要求所定义的。\n相关的申请资料：\n本申请涉及美国临时专利申请号60/150,358，其申请日为1999 年8月24日。\n本申请还涉及美国临时专利申请号60/150,365(律师档案号 0125.0027)，其申请日同样为1999年8月24日，发明名称为“制 备鼻病毒蛋白酶抑制剂的有效方法，用于制备该抑制剂的关键中间体 和连续膜反应器”，发明人为：J.Tao，S.Babu，R.Dagnino，Jr.， Q.Tian，T.Remarchuk，K.McGee，N.Nayyar和T.Moran。上述 申请还涉及制备鼻病毒蛋白酶抑制剂的合成路线及其制备中所用的 关键中间体。本申请以上述申请为基础并将其引入文中作为参考。