一种重组hCE1蛋白的可溶性表达和纯化方法

发明专利无效专利

申请号：
CN201310626175.9
IPC分类号：C12N15/55;C12N15/70;C12N9/18
申请日期：
2013-11-29
申请人：
湖南师范大学;长沙赢润生物技术有限公司

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著录项信息

专利名称	一种重组hCE1蛋白的可溶性表达和纯化方法
申请号	CN201310626175.9	申请日期	2013-11-29
法律状态	驳回	申报国家	中国
公开/公告日	2014-03-19	公开/公告号	CN103642825A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/55 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/52 编码酶或酶原的基因〔5〕 C12N15/55 水解酶（3）〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;5;5;;;C;1;2;N;1;5;/;7;0;;;C;1;2;N;9;/;1;8查看分类表>
申请人	湖南师范大学;长沙赢润生物技术有限公司	申请人地址	湖南省长沙市岳麓区麓山路36号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	湖南师范大学,长沙赢润生物技术有限公司	当前权利人	湖南师范大学,长沙赢润生物技术有限公司
发明人	吕媛;易银沙;童金英;王雷;易尚辉;刘彩云
代理机构	长沙永星专利商标事务所	代理人	周咏;林毓俊

摘要

本发明涉及一种重组hCE1蛋白的可溶性表达和纯化方法，包括以生物信息学软件预测hCE1蛋白最佳抗原表位区的分布；用PCR技术扩增含hCE1蛋白最佳抗原表位区的基因截短片段；将得到的基因截短片段克隆至原核表达载体，构建hCE1基因原核表达重组质粒；将构建的hCE1基因原核表达重组质粒转化宿主细胞，获得转化的宿主细胞；培养转化的宿主细胞，以表达重组hCE1蛋白；分离、纯化重组hCE1蛋白。采用本发明方法，达到了理想的蛋白纯度和产量，为后期制备优质的抗hCE1多克隆抗体、抗hCE1单克隆抗体及高特异性的hCE1ELISA试剂盒等研究工作提供了物质基础。

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