一种对RNA分子进行绝对定量的高通量测序方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201811145601.6
IPC分类号：C12Q1/6851
申请日期：
2018-09-29
申请人：
曲阜师范大学

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著录项信息

专利名称	一种对RNA分子进行绝对定量的高通量测序方法
申请号	CN201811145601.6	申请日期	2018-09-29
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2019-01-08	公开/公告号	CN109161586A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12Q1/6851 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12Q 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（免疫检测入G01N33/53）；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制〔3〕 C12Q1/00 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（带有条件测量或传感器的测定或试验装置，如菌落计数器入C12M1/34）；其组合物；这种组合物的制备方法〔3，2006.01〕 C12Q1/68 包括核酸〔3，2006.01，2018.01〕 C12Q1/6844 核酸扩增反应〔2018.01〕 C12Q1/6851 定量扩增〔2018.01〕	IPC分类号	C;1;2;Q;1;/;6;8;5;1查看分类表>
申请人	曲阜师范大学	申请人地址	山东省济宁市曲阜市静轩西路57号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	曲阜师范大学	当前权利人	曲阜师范大学
发明人	曹博
代理机构	济南泉城专利商标事务所	代理人	李桂存

摘要

本发明提供了一种对RNA分子进行绝对定量的高通量测序方法：RNA样品脱磷酸化；再通过T4RNA连接酶，连接脱磷酸化的RNA与DNA接头1，捕捉95%以上的RNA；之后用去甲基化酶减少RNA修饰；再去除多余的接头1；然后以上述RNA为模板逆转录得到cDNA；再降解RNA模板；通过T4DNA连接酶连接cDNA与发卡结构的DNA接头2，连接98%以上cDNA；再去除多余的接头2；最后进行PCR引物扩增并测序。本发明通过特殊设计DNA接头，克服了现有RNA测序技术中连接效率偏好性导致的无法精确定量，以及无法捕捉含有修饰位点的RNA分子的缺陷，实现了能够实现对不同来源的RNA样品中所有RNA分子进行绝对定量。本发明的方法简便，可用于临床分子诊断、分子生物学研究、细菌抗药性、癌症发生及预防等领域。

序号	公开(公告)号	公开(公告)日	申请日	专利名称	申请人
该专利没有引用任何外部专利数据！

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