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转基因作物中新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)双抗体夹心ELISA定量检测方法

发明专利有效专利
  • 申请号:
    CN201310365343.3
  • IPC分类号:G01N33/577;C07K16/40;C07K16/06
  • 申请日期:
    2013-08-20
  • 申请人:
    山东农业大学
著录项信息
专利名称转基因作物中新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)双抗体夹心ELISA定量检测方法
申请号CN201310365343.3申请日期2013-08-20
法律状态授权申报国家中国
公开/公告日2013-12-18公开/公告号CN103454424A
优先权暂无优先权号暂无
主分类号G01N33/577IPC分类号G;0;1;N;3;3;/;5;7;7;;;C;0;7;K;1;6;/;4;0;;;C;0;7;K;1;6;/;0;6查看分类表>
申请人山东农业大学申请人地址
山东省泰安市岱宗大街61号 变更 专利地址、主体等相关变化,请及时变更,防止失效
权利人山东农业大学当前权利人山东农业大学
发明人柴同杰;王新桐
代理机构暂无代理人暂无
摘要
本发明涉及一种转基因作物中新霉素磷酸转移酶(NPT Ⅱ)双抗体夹心ELISA定量检测方法,该检测方法是以体外条件下制备NPT Ⅱ蛋白为免疫原,制备兔抗NPT Ⅱ多克隆抗体为包被抗体,鼠抗NPT Ⅱ单克隆抗体作为捕获抗体,建立并优化了双抗体夹心ELISA方法,以系列含量的NPT Ⅱ蛋白作为标准,建立标准曲线,并对该方法各项指标进行验证。具体包括以下步骤:(1)NPT Ⅱ基因的克隆与表达;(2)抗NPT Ⅱ蛋白单克隆抗体的制备;(3)抗NPT Ⅱ蛋白多克隆抗体的制备;(4)双抗体夹心ELISA方法及标准曲线的建立;该方法灵敏度高、特异性强,并具有良好的重复性和稳定性,操作简单,适用于检测转基因作物中NPT Ⅱ含量。

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