一种降低单细胞扩增偏倚性的离体组织细胞核分离方法

发明专利有效专利

申请号：
CN202011137169.3
IPC分类号：C12Q1/6806;C12Q1/6869
申请日期：
2020-10-22
申请人：
上海交通大学医学院

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法律信息

引证文献

著录项信息

专利名称	一种降低单细胞扩增偏倚性的离体组织细胞核分离方法
申请号	CN202011137169.3	申请日期	2020-10-22
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2021-01-29	公开/公告号	CN112280828A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12Q1/6806 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12Q 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（免疫检测入G01N33/53）；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制〔3〕 C12Q1/00 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（带有条件测量或传感器的测定或试验装置，如菌落计数器入C12M1/34）；其组合物；这种组合物的制备方法〔3，2006.01〕 C12Q1/68 包括核酸〔3，2006.01，2018.01〕 C12Q1/6806 制备用于分析的核酸，例如用于聚合酶链式反应〔PCR〕分析（ C12Q 1/6804 优先）〔2018.01〕	IPC分类号	C;1;2;Q;1;/;6;8;0;6;;;C;1;2;Q;1;/;6;8;6;9查看分类表>
申请人	上海交通大学医学院	申请人地址	上海市黄浦区重庆南路227号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	上海交通大学医学院	当前权利人	上海交通大学医学院
发明人	王慧;何牮;孟梅;刘宁宁
代理机构	上海旭诚知识产权代理有限公司	代理人	郑立

摘要

本发明公开了一种降低扩增偏倚性的单细胞测序的细胞核分离方法及其应用，该方法包括：将待提取样品在在二号缓冲液中进行裂解处理；将裂解产物进行第一次离心处理，获得细胞核沉淀；将所述细胞核沉淀进行冲洗并在一号缓冲液中重悬，并进行第二次离心处理，最终在三号缓冲液中重悬混匀，以获得最终所需的细胞核。该方法只需常规、简单的试剂耗材，不需要昂贵的分离设备及长时间的梯度离心等操作，便可从较少的组织样本或者细胞中获得足量、完整的单个细胞核用于单细胞全基因实验研究，该方法相较于市售试剂盒处理过的细胞核，用于后续的全基因组扩增产物具更好的扩增均一性，与完整的单个细胞具备相近的扩增效果，同时省时且节约成本。

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