一种从植物中提取分离熊果酸的方法

1.一种从植物中提取分离熊果酸的方法，按以下步骤进行：
1)提取
①取泡桐叶粗粉，加入6-8被倍量甲醇回流提取，前两次各两小时，后 两次各一小时，合并提取液，放置过夜；
②过滤后，将滤液浓缩，回收甲醇至小体积后，放置沉淀；
③再过滤，滤液弃去，沉淀用丙酮少量多次洗去杂质；
④用无水乙醇溶解后热过滤，放置析晶；
⑤同法重结晶一次；
⑥最后用甲醇-乙醇混合溶剂重结晶；放置得到白色针状结晶；
2)鉴别
①取少量此结晶用无水乙醇溶解，与熊果酸标准品同时点样；
②在硅胶G板上，以苯∶95％乙醇，比例9∶1为展开剂展开，以醋酐-浓 硫酸为显色剂，日光下为紫红色斑点，365nm下为橙黄色荧光斑点，二者Rf 值相同，颜色一致；
③以环己烷∶氯仿∶乙酸乙酯，比例20∶5∶8为展开剂展开，显色后在 同一位置亦有相同颜色的斑点；
④用少量晶体测定熔点，mp：277℃-278℃，证明所得晶体为熊果酸。
2.如权利要求1所述的从植物中提取分离熊果酸的方法，其特征在于， 所述甲醇回流提取步骤可以采用无水乙醇回流提取，还可以采用索式提取并用 石油醚和氯仿除杂，也可以采用甲醇超声振荡法进行提取。

一、所属领域\n本发明属于天然产物研究，涉及一种有重要应用价值的天然产物提取，特 别涉及一种从植物中提取分离熊果酸的方法。\n二、背景技术\n熊果酸具有明显的安定与降温作用，体外对革兰氏阳性菌、阴性菌和酵母 菌有活性，对体外肝癌细胞培养具有非常显著的抑制率，动物实验证明熊果酸 具有降低转氨酶的作用。医药工业上已将熊果酸作为药品生产的原料。对熊果 酸的研究报道很多，多种植物中均含有熊果酸，但含量高低不一。泡桐叶中熊 果酸的含量高，对于这个研究也只有1963年日本有过文献报道。关于熊果酸 的提取方法，文献报道的方法大多以提取后用不同溶剂萃取，再对不同部分进 行硅胶柱层析或氧化铝柱层析，梯度洗脱而得。这种方法不仅费时，而且不利 于工业大生产。还有的文献报道是利用三种溶剂进行溶提，所用溶剂多为氯仿、 石油醚、乙醚和乙酸乙酯。根据实验证明，这些溶剂除杂不完全，而且多次反 复提取使成分损失大且使生产成本提高。\n三、发明内容\n针对熊果酸的提取方法的难易及含量差异，本法目的在于提供一种简单、 低成本、高产率、适合工业生产的从植物中提取分离熊果酸的方法。\n实现上述目的的解决方案是，从植物中提取分离熊果酸的方法，按以下步 骤进行：\n1.提取\n取泡桐叶粗粉，加入6-8被倍量甲醇回流提取，前两次各两小时，后两次 各一小时。合并提取液，放置过夜。过滤后，将滤液浓缩，回收甲醇至小体积 后，放置沉淀。过滤，滤液弃去，沉淀用丙酮少量多次洗去杂质。用无水乙醇 溶解后热过滤，放置析晶；同法重结晶一次。最后用甲醇-乙醇(1∶5)混合 溶剂重结晶。放置得到白色针状结晶。\n2.鉴别\n取少量此结晶用无水乙醇溶解，与熊果酸标准品同时点样。在硅胶G板上， 以苯-95％乙醇(9∶1)为展开剂展开，以醋酐-浓硫酸为显色剂，日光下为紫红 色斑点，365nm下为橙黄色荧光斑点。二者Rf值相同，颜色一致。以环己烷- 氯仿-乙酸乙酯(20∶5∶8)为展开剂展开，显色后在同一位置亦有相同颜色 的斑点。\n用少量晶体测定熔点，mp：277℃-278℃，故证明所得晶体为熊果酸。\n本法提取工艺简单，成本低，原料易得，提取效率高，有利于工业生产。\n四、具体实施方式\n以下结合发明人给出的较佳实施例对本发明作进一步详细说明。\n实施例1：依本发明的技术方案，提取泡桐叶中的熊果酸，按以下步骤进 行：\n1.提取\n取泡桐叶粗粉，加入6-8倍量甲醇回流提取，前两次各两小时，后两次各 一小时。合并提取液，放置过夜。过滤后，将滤液浓缩，回收甲醇至小体积后， 放置沉淀。过滤，滤液弃去，沉淀用丙酮少量多次洗去杂质。用无水乙醇溶解 后热过滤，放置析晶。同法重结晶一次。最后用甲醇-乙醇(1∶5)混合溶剂 重结晶。放置得到白色针状结晶。\n2.鉴别\n取少量此结晶用无水乙醇溶解，与熊果酸标准品同时点样。在硅胶G板上， 以苯-95％乙醇(9∶1)为展开剂展开，以醋酐-浓硫酸为显色剂，日光下为紫红 色斑点，365nm下为橙黄色荧光斑点。二者Rf值相同，颜色一致。以环己烷- 氯仿-乙酸乙酯(20∶5∶8)为展开剂展开，显色后在同一位置亦有相同颜色 的斑点。\n用少量晶体测定熔点，mp：277℃-278℃，证明所得晶体为熊果酸。\n实施例2：本实施例与实施例1所不同的是，在步骤1中用无水乙醇进行 回流提取。\n实施例3：本实施例与实施例1所不同的是，在步骤1中用索式提取并用 石油醚和氯仿除杂。\n实施例4：本实施例与实施例1所不同的是，在步骤1中用甲醇超声振荡 法进行提取。\n五、参考文献\n[1].卞象梅，姜志义，沈林 中药栀子有效成分的研究 中草药通讯 1976，15(9)：15-17\n[2].侯遇成 女贞叶化学成分的研究 中草药通讯1976，14(1)：14-16\n[3].许强 乌苏酸提取方法介绍 中国中药杂志1989，14(3)：41\n[4].张宝琛，甄润德，胡伯林等 湿生萹蕾化学成分的研究 中草药 1980，11(4)：149-151