一种GyV9环形病毒VP3蛋白制备方法

发明专利无效专利

申请号：
CN201610937115.2
IPC分类号：C07K14/01;C12N15/70;C12N15/11
申请日期：
2016-11-01
申请人：
扬州大学

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著录项信息

专利名称	一种GyV9环形病毒VP3蛋白制备方法
申请号	CN201610937115.2	申请日期	2016-11-01
法律状态	驳回	申报国家	中国
公开/公告日	2017-04-19	公开/公告号	CN106565829A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C07K14/01 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C07 有机化学〔2〕 C07K 肽（含有β-内酰胺的肽入C07D；在分子中除了形成本身的肽环外不含有任何其他的肽键的环状二肽，如哌嗪-2，5-二酮入C07D；环肽型麦角生物碱入C07D 519/02；单细胞蛋白质、酶入C12N；获得肽的基因工程方法入C12N 15/00）〔4〕 C07K14/00 具有多于20个氨基酸的肽；促胃液素；生长激素释放抑制因子；促黑激素；其衍生物〔6〕 C07K14/005 来自病毒〔6〕 C07K14/01 DNA病毒〔6〕	IPC分类号	C;0;7;K;1;4;/;0;1;;;C;1;2;N;1;5;/;7;0;;;C;1;2;N;1;5;/;1;1查看分类表>
申请人	扬州大学	申请人地址	江苏省扬州市邗江区大学南路88号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	扬州大学	当前权利人	扬州大学
发明人	叶建强;刘敏;姚晓慧;季星妤;韦芊含;邵红霞;秦爱建;田晓彦;万志敏
代理机构	南京钟山专利代理有限公司	代理人	戴朝荣;宁菁

摘要

本发明还提供了一种GyV9环形病毒VP3蛋白制备方法，该方法基于重组酶ExnaseTMII将线性化的pGEX‑6p‑1载体与GyV9病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应，直接重组克隆技术；并转化到大肠杆菌，实现VP3蛋白表达；其中，PCR扩增所述的GyV9病毒VP3基因片段时所用引物的核苷酸序列如下：上游引物1：5’‑GTTCCAGGGGCCCATGGATGCGACGGGCAC‑3’；下游引物1：5’‑GTTTTCACCGTCATTACAATCTTGCGCCTT‑3’。该方法简化克隆过程，可快速构建GyV9病毒VP3基因的原核表达载体，实现VP3基因快速克隆表达。本发明获得的GyV9病毒VP3表达及纯化的蛋白，可直接提供VP3蛋白作为GyV9诊断抗原；作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体；为开展GyV9流行病学调查提供有效诊断试剂；并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。

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