基于Ngpiwi蛋白介导的牛源大肠杆菌基因敲除菌株及其构建方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201811318486.8
IPC分类号：C12N1/21;C12N15/70;C12R1/19
申请日期：
2018-11-07
申请人：
华中农业大学

基础信息

权利要求

说明书

PDF全文

法律信息

引证文献

著录项信息

专利名称	基于Ngpiwi蛋白介导的牛源大肠杆菌基因敲除菌株及其构建方法
申请号	CN201811318486.8	申请日期	2018-11-07
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2019-04-09	公开/公告号	CN109593694A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N1/21 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N1/00 微生物本身，如原生动物；及其组合物（含有由原生动物、细菌或病毒得到的材料的药物的制备入A61K35/66；从藻类材料制备药物的入A61K36/02；从真菌中材料制备药物的入A61K36/06；药用细菌的抗原或抗体组合物的制备，如细菌菌苗入A61K39/00）；繁殖、维持或保藏微生物或其组合物的方法；制备或分离含有一种微生物的组合物的方法；及其培养基〔3，2006.01〕 C12N1/20 细菌；其培养基〔3〕 C12N1/21 引入外来遗传物质修饰的〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;/;2;1;;;C;1;2;N;1;5;/;7;0;;;C;1;2;R;1;/;1;9查看分类表>
申请人	华中农业大学	申请人地址	湖北省武汉市洪山区狮子山街1号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	华中农业大学	当前权利人	华中农业大学
发明人	张安定;付磊;韩丽;靳泽华;周红波
代理机构	武汉开元知识产权代理有限公司	代理人	王和平;冯超

摘要

本发明公开了一种基于Ngpiwi蛋白介导的牛源大肠杆菌基因敲除菌株及其构建方法；所述牛源大肠杆菌基因敲除菌株为在牛源大肠杆菌基因组上缺失潜在毒力相关基因的ORF序列或部分序列的缺失菌株。该方法首先成功构建带有Ngpiwi和待缺失靶基因序列左右同源臂的重组质粒；其次将重组质粒化学转化至牛源大肠杆菌中，在28℃传代诱导双交换重组，PCR筛选出缺失靶基因序列的菌株，之后在无抗生素培养基中37℃诱导质粒丢失，从而获得缺失潜在毒力基因相关序列的菌株。该遗传操作系统质粒较小，操作容易，应用广泛，不存在潜在的脱靶效应，敲除效率较高，无抗性基因筛选标记，为牛源大肠杆菌基因工程疫苗的研发提供了优良工具。

序号	公开(公告)号	公开(公告)日	申请日	专利名称	申请人
该专利没有引用任何外部专利数据！

序号	公开(公告)号	公开(公告)日	申请日	专利名称	申请人
该专利没有被任何外部专利所引用！

我浏览过的专利

专利服务由北京酷爱智慧知识产权代理公司提供