一种利用甲醇酵母系统高效表达tPA等外源蛋白的方法及其表达产物的纯化制备技术

发明专利无效专利

申请号：
CN200410017881.4
IPC分类号：C12P21/00;C12N15/62
申请日期：
2004-04-23
申请人：
黄秀东;唐德江

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著录项信息

专利名称	一种利用甲醇酵母系统高效表达tPA等外源蛋白的方法及其表达产物的纯化制备技术
申请号	CN200410017881.4	申请日期	2004-04-23
法律状态	撤回	申报国家	中国
公开/公告日	2006-04-12	公开/公告号	CN1757745
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12P21/00 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12P 发酵或使用酶的方法合成目标化合物或组合物或从外消旋混合物中分离旋光异构体〔3〕 C12P21/00 肽或蛋白质的制备（单细胞蛋白质入C12N 1/00）〔3〕	IPC分类号	C;1;2;P;2;1;/;0;0;;;C;1;2;N;1;5;/;6;2查看分类表>
申请人	黄秀东;唐德江	申请人地址	上海市浦东新区碧云路333弄中天碧云苑18号603室变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	黄秀东,唐德江	当前权利人	黄秀东,唐德江
发明人	黄秀东;李树刚;于廷和
代理机构	重庆市恒信专利代理有限公司	代理人	刘小红

摘要

本发明涉及一种甲醇酵母通用表达载体PICZa－DoI的构建，其关键是可以利用该表达系统以融合蛋白的方式生产一类常规方法难以高水平表达的外源重组蛋白。采用此表达系统已经成功的表达了突变型人组织纤溶酶原激活物(rPA)、人膜联蛋白V－尿激酶活性片段融合蛋白(Anx－scUK)和突变型人神经生长因子(mut－hNGF)等。该表达系统的产生的融合蛋白可以通过螯合层析(Chelating Sepharose FF)介质从发酵液中直接捕获，经过脱盐、酶切或化学切割开融合蛋白，再用常规的层析介质就可以纯化制备出纯度合乎要求的目的蛋白作为医药用途。

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