一种检测土壤中大肠杆菌O157:H7活菌的方法

发明专利有效专利

申请号：
CN202010641129.6
IPC分类号：C12Q1/6851;C12Q1/689;C12Q1/10;C12Q1/06;C12R1/19
申请日期：
2020-07-06
申请人：
浙江大学

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专利名称	一种检测土壤中大肠杆菌O157:H7活菌的方法
申请号	CN202010641129.6	申请日期	2020-07-06
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2020-09-15	公开/公告号	CN111662963A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12Q1/6851 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12Q 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（免疫检测入G01N33/53）；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制〔3〕 C12Q1/00 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（带有条件测量或传感器的测定或试验装置，如菌落计数器入C12M1/34）；其组合物；这种组合物的制备方法〔3，2006.01〕 C12Q1/68 包括核酸〔3，2006.01，2018.01〕 C12Q1/6844 核酸扩增反应〔2018.01〕 C12Q1/6851 定量扩增〔2018.01〕	IPC分类号	C;1;2;Q;1;/;6;8;5;1;;;C;1;2;Q;1;/;6;8;9;;;C;1;2;Q;1;/;1;0;;;C;1;2;Q;1;/;0;6;;;C;1;2;R;1;/;1;9查看分类表>
申请人	浙江大学	申请人地址	浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	浙江大学	当前权利人	浙江大学
发明人	沈超峰;符玉龙;贾洋洋;范佳慧
代理机构	杭州求是专利事务所有限公司	代理人	傅朝栋;张法高

摘要

本发明公开了一种检测土壤中大肠杆菌O157:H7活菌的方法。本发明的方法经土壤细胞提取和梯度密度分离处理，通过溴化叠氮丙锭与实时荧光聚合酶链式反应(PMA‑qPCR)快速定量检测土壤中大肠杆菌O157:H7活菌数。该方法能够对土壤中102‑106CFU/g范围内的大肠杆菌O157:H7活菌进行准确定量。与传统培养法相比，该方法具有快速、定量准确、灵敏度高和操作简便的优点。该检测方法优化了土壤悬液高浊度和高死活菌比例的限制因素，提高了该方法适用性。本发明建立的检测方法为土壤中大肠杆菌O157:H7活菌的快速定量检测提供有效手段。

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