一种基于体细胞胚发生的细叶百合高效遗传转化体系

发明专利有效专利

申请号：
CN201810202479.5
IPC分类号：C12N15/82;A01H5/00;A01H4/00;A01H6/56
申请日期：
2018-03-13
申请人：
沈阳农业大学

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专利名称	一种基于体细胞胚发生的细叶百合高效遗传转化体系
申请号	CN201810202479.5	申请日期	2018-03-13
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2018-07-20	公开/公告号	CN108300735A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/82 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/63 使用载体引入外来遗传物质；载体；其宿主的使用；表达的调节〔5〕 C12N15/79 专门适用于真核细胞宿主的载体或表达系统〔5〕 C12N15/82 用于植物细胞〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;8;2;;;A;0;1;H;5;/;0;0;;;A;0;1;H;4;/;0;0;;;A;0;1;H;6;/;5;6查看分类表>
申请人	沈阳农业大学	申请人地址	辽宁省沈阳市沈河区东陵路120号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	沈阳农业大学	当前权利人	沈阳农业大学
发明人	孙红梅;严瑞;王志平;王春夏;李宏宇
代理机构	沈阳科威专利代理有限责任公司	代理人	张述学

摘要

本发明涉及一种基于体细胞胚发生的细叶百合高效遗传转化体系，其工艺步骤包括：通过体细胞胚发生技术体系诱导胚性愈伤组织；抗生素潮霉素和硫酸卡那霉素适宜浓度的筛选；农杆菌侵染液的制备；侵染和共培养；抗性愈伤组织的筛选和继代培养；抗性体细胞胚的萌发与成苗；转基因植株的GUS组织学染色和PCR检测。本发明以百合的胚性愈伤组织为受体材料，首次在遗传转化后诱导产生体细胞胚进而直接发育形成完整植株，转化效率比其他种类百合现有的报道显著提高，可达29.17%。其优势在于受体细胞基数大，转化后诱导的体细胞胚是单细胞起源，很好地避免嵌合体的产生，且转化后代外源基因遗传稳定性高，变异率低。

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