提高DNA甲基化的小鼠胚胎干细胞培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201911135063.7
IPC分类号：C12N5/0735;C12N5/10
申请日期：
2019-11-19
申请人：
内蒙古大学

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著录项信息

专利名称	提高DNA甲基化的小鼠胚胎干细胞培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法
申请号	CN201911135063.7	申请日期	2019-11-19
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2020-02-14	公开/公告号	CN110791472A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N5/0735 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N5/06 （转入C12N 5/07） C12N5/07 动物细胞或组织〔2010.01〕 C12N5/071 脊椎动物细胞或组织，例如人类细胞或组织〔2010.01〕 C12N5/073 胚胎细胞或组织；胎儿细胞或组织〔2010.01〕 C12N5/0735 胚胎干细胞；胚胎生殖细胞〔2010.01〕	IPC分类号	C;1;2;N;5;/;0;7;3;5;;;C;1;2;N;5;/;1;0查看分类表>
申请人	内蒙古大学	申请人地址	内蒙古自治区呼和浩特市玉泉区昭君路24号内蒙大学南校区变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	内蒙古大学	当前权利人	内蒙古大学
发明人	包斯琴;吴宝江;张宝静;李喜和
代理机构	天津市杰盈专利代理有限公司	代理人	赵敬

摘要

本发明公开了一种提高DNA甲基化的小鼠胚胎干细胞培养液及小鼠胚胎干细胞诱导培养方法，第一步将小鼠2i/L‑ESCs用N2B27中添加白血病抑制因子（LIF培养液）进行诱导获得只依赖LIF的小鼠胚胎干细胞（L‑ESCs），并鉴定了其多能性。第二步是将小鼠2i/LIF‑ESCs培养体系换成15%胎牛血清中添加白血病抑制因子的培养液(S/L培养液)，培养5天后，再替换成LIF培养液进行培养，高效率得到L‑ESCs。更换S/L培养液的主要目的是为了提高小鼠ESCs的DNA甲基化水平，这样可有效提高LIF依赖性ESCs的重编程效率。本发明首先诱导了只依赖LIF的小鼠ESCs，并鉴定了其特性；其次利用特定的诱导方法提高了LIF依赖性小鼠ESCs重编程效率，对哺乳动物多能干细胞体外培养提供新思路。

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