含有L-氨基酸的肥料用于改善根部生长及菌根生长的用\n途\n[0001] 本发明涉及一种影响植物生物量分配的肥料的用途。更具体而言,所述肥料能够促进根部生长、细根发育、增加根尖数量和促进菌根发育。因而,本发明提供了使用肥料来促进根部生长、细根发育、增加根尖数量和促进菌根发育的方法。此外,本发明还提供了一种使用肥料来调节生物量的根部分数的方法。\n背景技术\n[0002] 芽部(shoots)和根部之间的生长分配是植物适应不同环境状况的主要过程。众所周知,供氮是该过程的主要决定因素。在高供氮时,相对于地下结构的生长,地上部分的生长得到促进,而在低供氮时,根部生长增强(图1)。已经针对多种植物物种和多种不同的氮添加比率对这种分配对氮供应的强烈依赖性进行了证实。因此,供氮会改变植物的结构并由此改变植物对各种胁迫如风和干旱的耐受性。\n[0003] 氮影响植物生物量分配的一般观念在于在较高的供氮比率下,植物感知对氮摄取的需求降低,由此根部生长下降,而对碳摄取的需求增加,由此芽部生长增加。这种氮和碳的获取与生物量分配之间的简单关系可以通过外因以及通过感知植物中的关键代谢物(如蔗糖和谷氨酰胺)的水平来进行调节。\n[0004] 在植物栽培过程中,养分特别是氮的充分供给是良好生长的先决条件。如上所述,大量的养分通常促进地上部位的生长多于促进地下部位的生长,因而,商业上栽培的植物因为养分的充分供给而常常具有高而不均衡的芽部质量分数。但是,存在许多情形,其中具有高根部质量分数的植物优于具有低根部质量分数的植物。通常,用于户外种植的预栽培植物或者由插条长起的植物应当具有高根部质量分数以便能够在种植之后有效成活。因此,在植物或秧苗被预先栽培以用于后期种植的所有情形中,高根部质量分数对于生长和成活将是一个积极因素。\n[0005] 从以上所述可以得出结论,植物的有效栽培与最佳植物分配模式相矛盾。在栽培过程中对高生长速率的需要只有通过施用大量的氮才能实现,这进而与根部生长相比更多地促进了芽部的生长,从而导致分配不均衡。理想地,植物栽培条件应当允许有效的生长,但仍然具有高的根部质量分数。用目前的栽培方法,这是不可能实现的。\n[0006] 在过去的10年间,许多研究都已经表明有机氮化合物尤其是氨基酸是植物的重要氮源。这些研究已经证实了在田地和实验室环境中对于多种不同植物物种均发生氨基酸吸收,所述植物物种包括菌根类和非菌根类植物以及还有多种作物,所述多种作物例如为小麦、玉米、大麦(Lipson和 ,2001)。几项研究已经阐明了所吸收的有机氮化合物在根部吸收之后是如何代谢的,并且还表明这类来源的氮是如何被纳入到蛋白质中的。\n此外,许多研究已经证实了植物可以使用有机氮化合物用于生长。因此,现已广泛地公认诸如氨基酸的有机氮化合物可以用作植物的氮源。\n[0007] 通常认为,在吸收之后的所有氮形式(即无机和有机氮形式)被代谢,从而在植物内形成可用于植物生长的共用氮库。因而,根据该常识,所有被植物根部吸收的氮形式将作为共用氮库的一部分,因此,被植物根部吸收的氮的所有形式都应当在植物中均匀散布。\n[0008] 从RU2016510的体外研究可知,含有氨基酸混合物的蛋白质水解产物已被用于促进溶液培养过程中愈伤组织的生根和植物生长。在该专利中没有教导利用纯的天然L-氨基酸来促进植物的根部生长。\n[0009] AU659115公开了一种含有天然L-氨基酸的肥料的制备方法及其用途,所述肥料是通过至少两种蛋白水解酶的酶消化法制备的。AU659115仅仅讨论了使用小分子(氨基酸)作为养分来提高吸取的优点。并没有教导利用纯的天然L-氨基酸来促进植物的根部生长。此外,在这两个专利中也没有教导在其促进整株植物生长的同时促进菌根的发育。\n[0010] EP 1284945描述了一种适于植物,特别是适于针叶树的肥料。该肥料的有利特征在于其充分固定,由此使得不期望的氮流失至环境减至最小。肥料的主要氮源是L-形式的碱性氨基酸或其盐,尤其是L-精氨酸。该文件完全没有涉及对根部生长和菌根发育的促进。\n[0011] 因而,仍然需要具有促进根部生长和/或菌根发育的能力同时又能促进整株植物生长的含氮肥料。\n[0012] 已经观察到,不同种类的植物在森林更新中种植于户外时生长缓慢或者具有缓慢的开端。\n[0013] 还进一步推测,高根部质量分数以及大量的根尖或细根将有助于这些小植物在新的生长环境中有效成活。\n[0014] 总之,需要一种可用来增加植物根部质量分数,增加根、根尖的数量以及增加细根数量而不危害整株植物生长的肥料。\n发明内容\n[0015] 现已出乎意料地表明,可提供一种能够在促进整株植物的生长的同时又能够诱发并促进根部生长以及菌根发育的肥料。\n[0016] 本发明提供了一种使用肥料用于促进根部生长的方法,所述肥料的特征在于其包含天然L-氨基酸作为氮源。\n[0017] 此外,本发明提供了一种使用肥料用于促进菌根发育的方法,所述肥料的特征在于其包含天然L-氨基酸作为氮源。\n[0018] 本发明还提供了一种使用肥料用于促进根部生长和/或用于促进菌根发育的方法,所述肥料包含作为选自L-谷氨酰胺、L-天冬酰胺和L-精氨酸的氨基酸主要氮源,以及包含任选合适的防腐剂。\n[0019] 此外,还公开了含有天然L-氨基酸作为主要氮源的肥料用以促进根部生长和/或用以促进菌根发育的用途。\n[0020] 此外,还公开了含有天然L-氨基酸,特别是含有选自L-精氨酸、L-天冬酰胺和L-谷氨酰胺的L-氨基酸作为氮源的肥料用以促进根部生长和/或用以促进菌根发育的用途。\n[0021] 此外,还公开了其中还包含无机氮的肥料的用途。\n[0022] 此外,所述L-氨基酸选自L-精氨酸、L-天冬酰胺、甘氨酸、L-谷氨酸和L-谷氨酰胺。\n[0023] 此外,还公开了肥料的用途,其中氮源之中至少30wt%、优选其中氮源之中至少\n70wt%、优选至少85wt%且最优选至少90wt%是L-氨基酸,而其余的氮源是无机氮化合物,以使根苗生长的促进与L-氨基酸和无机氮化合物之间的比例相关。在一些实例中,所述L-氨基酸是L-精氨酸和/或L-谷氨酰胺。\n[0024] 还公开了一种利用肥料来调节生物量根部分数的方法。\n[0025] 此外,还公开了作为L-氨基酸的氮源的分数越高,生物量根部分数就越高,即,在所用肥料中L-氨基酸越多,就会得到越多的根、越多的细根以及越多的根尖,这在室外种植时可有助于植物。\n[0026] 此外,还公开了含有天然L-氨基酸的肥料的用途,其中所述肥料还含有合适的防腐剂。\n[0027] 此外,还公开了含有天然L-氨基酸的肥料的用途,其中所述防腐剂选自诸如以下的防腐剂:苯甲酸、乙酸、水杨酸、丙酸、山梨酸、柠檬酸,或它们的盐类以及防御素(alexin plus)。\n[0028] 此外,还公开了含有天然L-氨基酸的肥料的用途,其中所述肥料是固体或溶液。\n[0029] 本发明还提供了一种使用肥料来促进根部生长的方法,所述肥料包含选自L-谷氨酰胺、L-天冬酰胺和L-精氨酸的氨基酸作为主要氮源,以及包含任选合适的防腐剂。\n[0030] 本发明还提供了一种含有天然氨基酸的肥料。可用于本发明肥料中的天然氨基酸为甘氨酸、L-丙氨酸、L-缬氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-丝氨酸、L-半胱氨酸、L-苏氨酸、L-甲硫氨酸、脯氨酸、L-天冬氨酸、L-天冬酰胺、L-谷氨酸、L-谷氨酰胺、L-赖氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、L-苯丙氨酸、L-酪氨酸和L-色氨酸。在一个优选实施方案中,所述氨基酸选自甘氨酸、L-谷氨酸、L-谷氨酰胺和L-精氨酸。最优选地,所述氨基酸选自L-精氨酸和L-谷氨酰胺作为主要氮源。所述肥料还含有合适的防腐剂。\n[0031] 优选地,所述氮源中至少30wt%、优选至少70wt%、优选至少85wt%、最优选至少\n90wt%是天然氨基酸,例如L-精氨酸和/或L-谷氨酰胺。\n[0032] 此外,所述肥料的用途可以是特征在于所述肥料还含有无机氮化合物,例如硝酸盐或铵盐,用以同时促进根部和芽部的生长。\n[0033] 此外,无机氮化合物的实例为硝酸盐和铵盐。\n[0034] 优选地,所述防腐剂选自苯甲酸盐如苯甲酸钾、乙酸、水杨酸、丙酸、山梨酸、柠檬酸以及防御素。苯甲酸钾的典型浓度为400~3000ppm、优选600~2000ppm且最优选800~\n1200ppm。乙酸的典型浓度为2000~10000ppm、优选4000~8000ppm且最优选5000~\n7000ppm。水杨酸的典型浓度为250~2000ppm、优选500~1500ppm且最优选800-1200ppm。\n丙酸的典型浓度为2000~10000ppm、优选4000~8000ppm且最优选5000~7000ppm。山梨酸的典型浓度为2500~20000ppm、优选5000~15000ppm且最优选7500~12500ppm。\n防御素(Alexin plus)(Citrox Ltd,United Kingdom)的典型浓度为10000~50000ppm、优选20000~40000ppm且最优选25000-35000ppm。\n[0035] 优选地,所述肥料含有选自硫酸镁、硫酸钾、磷酸二氢钾、氯化钾和痕量元素的附加组分,其中所述痕量元素选自Fe、Mn、Cu、Zn、B和Mo。通常,所述肥料可包含2~5wt%、优选3~4wt%的硫酸镁,1~3wt%、优选2~3wt%的硫酸钾,优选4~5wt%的磷酸二氢钾,2~5wt%、优选3~4wt%的氯化钾。优选地,所述痕量元素是作为特别的痕量元素组合物添加的。这样的组合物的一个实例为可获自瑞典LMIAB的Micro+。Micro+在肥料中的含量通常为4~5wt%。\n[0036] 发明详述\n[0037] 以下将参考附图对本发明作进一步的说明,其中:\n[0038] 图1显示植物氮状况(对于生长最佳的N浓度%)对于以芽部生物量占总生物量分数表示的植物生物量分配的影响。A、B和C分别指来自挪威云杉(Picea abies)、扭叶松(Pinus contorta)和樟子松(Pinussylvestris)的实验的数据(来自Ingestad &\n1986);\n[0039] 图2表明在拟南芥(Arabidopsis thaliana)的整株植物中以及在秧苗根部中发现的源自L-谷氨酰胺和硝酸盐吸收的氮的含量。该图表明所吸收的L-谷氨酰胺优先用于根部生长。\n[0040] 图3公开了源自L-精氨酸吸收的氮的分配。向在3mM硝酸盐上生长的植物供应少量(30μM)的N-15标记的L-精氨酸。栽培21天之后,收获植物,将根部和芽部分离,随后分析它们的N-15的含量。在两种植物部位中以过量原子%表示的N-15的量显示来自L-精氨酸的氮优先用于根部生长;\n[0041] 图4A和4B显示了拟南芥植物的生物量和在硝酸铵或L-谷氨酰胺和硝酸盐上栽培的植物中生物量向根部和芽部的分配(4A),以及在硝酸铵或L-谷氨酰胺和硝酸盐上栽培的植物的根部质量分数(4B);\n[0042] 图5A和5B表明杨属(Populus)植物的生物量和在硝酸铵或L-谷氨酰胺和硝酸盐上栽培的植物中生物量向根部和芽部的分配(5A),以及在硝酸铵或L-谷氨酰胺和硝酸盐上栽培的植物的根部质量分数(5B)。\n[0043] 图6公开了苏格兰松(Scots pine)根部的壳多糖含量。植物是用铵盐和硝酸盐的混合物作为氮源栽培的(参比),用铵盐和硝酸盐栽培但在秋天最后一次施肥后供应精氨酸(精氨酸加载的),或者在整个生长季中用精氨酸作为唯一氮源栽培的(精氨酸栽植的)。壳多糖是真菌细胞壁的一部分,因而显示出菌根在整个根系中的分数。\n[0044] 图7公开了不同比例的L-谷氨酰胺(Gln)对总生物量产生(图7A)和根部产生(图7B)的影响。\n[0045] 图8公开了L-天冬酰胺(Asn)对总生物量产生(图8A)和根部产生(图8B)的影响。\n[0046] 通过一系列实验,本发明人已经发现,供有有机和无机氮形式的混合物的植物会不均衡地分配源自这些不同形式的氮,从而发现根部比其它植物部位含有更多份的源自有机氮形式的植物氮。在图2中,显示了其中给小的拟南芥植物供应铵盐和硝酸盐的混合物或L-谷氨酰胺和硝酸盐的混合物的实验结果。图2表明,对于整株植物,约50%的氮源自L-谷氨酰胺的吸收,而约75%的根部氮源自该氮形式。相反,全植物氮的约45%源自硝酸盐的吸收,而在根部氮中仅有约25%是源自该氮形式的吸收。类似地,当在硝酸盐上栽培拟南芥植物且向培养基中仅加入少量L-精氨酸时(图3),在根部中发现了比芽部中更高分数的源自L-精氨酸的氮。因此,这些实验表明,以氮形式混合物供应的植物利用有机氮主要是用于根部生长。\n[0047] 出乎我们意料的是,我们还发现与在铵盐和硝酸盐的混合物上获得的植物相比,供应有机和无机氮的混合物(在此情况下为L-谷氨酰胺和硝酸盐)的拟南芥植物的根部生长更容易得到促进(图4A和4B)。在第二个实验中,测试了不同的氮源混合物对杨属秧苗的影响(图5A和5B)。至于拟南芥,发现与供应铵盐和硝酸盐的那些相比,供应L-谷氨酰胺和硝酸盐的植物的根部质量分数显著提高。根据这些数据,对于供应有机和无机氮形式的混合物的植物而言,其植物生长情况类似于或优于仅供应无机形式的那些。同时,供应有机和无机氮的混合物的植物的根部质量分数明显更高。这表明,通过在有机氮上或者在无机和有机氮的混合物上栽培植物,可以获得比仅供应植物无机氮时更高的根部质量分数。\n[0048] 本发明涉及通过使用特定氨基酸作为植物栽培过程中的肥料来对植物生物量的分配进行调节的可能性。因此,其中特定氨基酸构成肥料中氮主体部分的混合物可用来专门提高植物的根部生长,并由此提高所产生植物的根部质量分数。相应地,具有无机氮形式占优势的混合物可用来专门增加植物的芽部质量分数。\n[0049] 许多植物与真菌形成共生体,称为菌根。众所周知的是,菌根在供应有高含量养分的植物上发育很差(Smith,S.E.,和D,J.Read.1997.Mycorrhizal symbiosis,第2版。\nAcademic Press,New York,New York.USA.)。已知菌根有益于植物并且促进植物吸收矿物养分和水分以及保护植物免遭各种病原体攻击。因而,栽培在自然条件下形成菌根的植物应当使得这样的共生体能够形成。然而,如上所述,高比率养分的加入可严重妨碍菌根在栽培植物上的发育或者不能使菌根在栽培植物上发育。\n[0050] 还已知形成菌根的几种真菌物种形成可食用的子实体(蘑菇)。但是,高比率养分的添加,即用于促进植物生长的条件,同样将妨碍子实体的产生。\n[0051] 上述在植物有效栽培和菌根与可食用蘑菇的同时发育之间的明显矛盾在很大程度上取决于肥料中大量氮的添加。\n[0052] 此外,完全没有预料到根尖的数量和细根的数量增加至如此高的水平,以致于有助于植物秧苗在种植后于第一阶段存活。\n[0053] 实施例涉及使用一种氨基酸,而不是两种或更多种氨基酸。所述肥料不是旨在用于体外,也无意用于切花类(cut flower)。\n[0054] 因此,理想的肥料应当不仅促进植物的生长,还应当促进形成菌根的共生真菌的生长。而且,理想的肥料还应当允许产生真菌子实体。出乎我们意料的是,我们发现在氨基酸上栽培的植物显示出菌根的高生长速率和旺盛的发育。在生长于氨基酸上的植物和生长于无机氮源(铵盐加硝酸盐)上但后期供应氨基酸的植物中均发现了菌根形成的促进。\n[0055] 所述肥料在其氮源中可以含有至少5wt%、至少10wt%、至少15wt%、至少\n20wt%、至少25wt%、至少30wt%、至少35wt%、至少40wt%、至少45wt%、至少50wt%、至少55wt%、至少60wt%、至少65wt%、至少70wt%、至少75wt%、至少80wt%、至少85wt%、至少90wt%或至少95wt%的L-氨基酸,优选L-精氨酸和/或L-谷氨酰胺。\n[0056] 实验方法\n[0057] 实施例1.精氨酸-氮在拟南芥中的分配\n[0058] 该实验是用野生型拟南芥在含有半强度的Murashige和Skoog(MS)培养基(Murashige和Skoog,1962)的无菌琼脂平板上进行的,所述培养基含有0.65%w/v琼脂\n15 15\n(植物琼脂,Duchefa Biochemie)、用3mM硝酸盐和30μM U- N(>98%,N)L-Arg改性并用3.6mM MES(2N-吗啉乙磺酸)缓冲至pH5.8的0.5%w/v蔗糖。植物生长19天,此时收获\n20株植物并分成4份(replicate)(即每份由5株植物组成)。将芽部和根部分离;冲洗根部并在0.5mM的CaCl2溶液中彻底清洗3次以从表面去除粘附的化合物。将芽部和根部在\n60℃干燥过夜、称重并匀浆化。最后,使用欧洲科学同位素比率质谱仪(Europe Scientific \n15\nIsotope RatioMass Spectrometer)分析样品以测定总的氮含量和 N含量。结果示于图3中。\n[0059] 实施例2.生物量和谷氨酰胺-N在拟南芥和白杨中的分配\n[0060] 分配实验是用野生型拟南芥在无菌琼脂平板上进行的,在白杨的情况下,在容纳有不含氮的、半强度的Murashige和Skoog(MS)培养基(Murashige和Skoog,1962)的等效物的塑料盒中进行,所述介质含有0.8%w/v琼脂(植物琼脂,Duchefa Biochemie)、0.5%+ -\nw/v蔗糖并且用MES缓冲液将pH设为5.8。以NH4 和NO3 的等摩尔混合物或相当于L-Gln-\n和NO3 各为50%的等摩尔混合物的形式将氮加入到琼脂中,两种混合物的总比率均相当于\n3mM的N。进行四种标记处理,即对于每种N混合物进行两种处理。因而,一半含有NH4NO3+ - -\n混合物的平板含有标记的NH4,另一半含有标记的NO3。类似地,一半具有L-Gln:NO3 混合-\n物的平板含有标记的L-Gln,另一半含有标记的NO3。对于每一种标记处理,1%的氮源是以\n15\nN进行施用的。高压灭菌后向琼脂混合物中加入无菌过滤的L-Gln。21天后收获拟南芥植物,并且在白杨植物生长28天后进行收获。将芽部和根部在60℃干燥过夜、称重并匀浆\n15\n化。最后,使用欧洲科学同位素比率质谱仪分析样品以测定总的氮含量和 N含量。从各植\n15\n物部位中过量原子% N和总氮含量的数值来计算源自不同植物部位(即芽部和根部)的两种氮源的N的含量。计算来自两种不同N混合物的植物的根部分数作为存在于根部中的生物量占总植物生物量的百分数。关于拟南芥的结果示于图4中,关于杨属的结果示于图\n5中。\n[0061] 表1.在NH4+和NO3-的混合物上或者在NO3-和L-Gln的混合物上生长的拟南芥和美洲黑杨(Populus deltoides)植物的根部质量分数,即存在于根部中的生物量占全植物生物量的分数\n[0062] \n 物种 NH4+NO3-混合物 NO3-L-Gln混合物\n 拟南芥 14,1±0,6% 19,2±0,3%\n 杨属 20,2±0,4% 26,2±1,7%\n[0063] 实施例3:评价苏格兰松根部的菌根\n[0064] 该植物在瑞典北部于生长季内在户外栽培。向植物供应含有硝酸铵或精氨酸作为氮源的复合营养溶液。精氨酸栽培的秧苗在生长季内每周施肥一次(每株秧苗总共50mg N),而参比植物则每周施肥2到3次(每株秧苗总共71.5mg N)。加载精氨酸的秧苗进行与参比秧苗一样的处理,除了在早秋于最后一次施肥后它们还接受精氨酸的脉冲式处理(pulse)。在该脉冲式处理中供应的精氨酸的量相当于每株秧苗为5mg氮。根部平均壳多糖含量可见于图6和表2中。所述值显示为平均值±标准估值,n=6。\n[0065] 表2:苏格兰松根部的壳多糖含量\n[0066] \n 肥料 壳多糖含量(mg壳多糖/g根部)\n 平均值±SE,n=6\n 参比 1.35±0.39\n 精氨酸加载 3.90±1.05\n 精氨酸栽培 2.72±1.81\n[0067] 结果清楚地表明,含有精氨酸的肥料导致根部中壳多糖的含量显著更高,这表明形成了菌根。\n[0068] 实施例4:典型的肥料组合物\n[0069] 组合物A:\n[0070] \n 组分 量\n L-精氨酸 233140g\n HCl(37%水溶液) 138990g\n 苯甲酸盐(防腐剂) 1000ppm\n 水 700000g\n 物理数据\n ξ 1.08\n pH 3.20\n 总重量(kg) 1080\n 总体积(l) 1000\n[0071] 向水中加入精氨酸和防腐剂并使之溶解,然后通过滴加浓HCl调节pH。在用水稀释至高达1000L的最终体积之前,测定最终的pH。组合物B:\n[0072] \n 组分 量\n MgSO4·7H2O 40900g\n K2SO4 27270g\n KH2PO4 54530g\n KCl 40900g\n 精氨酸 233140g\n Micro+ 55820g\n HCl(37%水溶液) 147560g\n 苯甲酸盐(防腐剂) 1000ppm\n 水 640000g\n 物理数据\n ξ 1.20\n pH 3.20\n 总重量(kg) 1200\n 总体积(l) 1000\n[0073] 首先使盐和防腐剂在水中溶解,然后加入Micro+(痕量元素组合物,可购自瑞典的LMI AB)。接着,使精氨酸溶解并用HCl水溶液(37%)将pH调节至3.2。最后,补足水至1000L。\n[0074] 实施例5:在拟南芥中受氮形式影响的生物量的生长和分配\n[0075] 在用不同氮源改进的培养基中使拟南芥植物无菌生长21天。所有培养基的总氮浓度均为6mM,在各处理中均以相同量提供所有其他的大量和微量的养分。\n[0076] 在图7A、7B和表3中的使用L-氨基酸L-谷氨酰胺的实验中,可以看出在根部生物量和作为氮源加入的L-谷氨酰胺的量之间存在明显而出乎意料的相关性。此外,可以看出与仅加入无机氮时相比,根部分数在加入L-氨基酸时更高(图7B)。这在所述L-氨基酸为L-天冬酰胺时非常明显,如图8B和表4所见。\n[0077] 可以注意到,采用不同氮源时,尽管总生物量相同(如图7A和8A中所见),但根部分数比预期的要高(如图7B和8B中所见)。\n[0078] 表3:利用L-谷氨酰胺时的根部分数和总生物量\n[0079] 根部 标准 标准 标准 标准[0080] N源 分数 偏差 误差 总生物量 偏差 误差[0081] NH4NO3 0,12 0,02 0,01 6,14 1,12 0,42[0082] NO3 0,12 0,01 0,01 4,63 0,98 0,35[0083] 33%Gln 67%NO3 0,15 0,01 0,00 6,59 0,99 0,35[0084] 50%Gln 50%NO3 0,16 0,01 0,00 6,16 1,06 0,37[0085] 67%Gln 33%NO3 0,17 0,01 0,00 6,13 1,37 0,52[0086] 表4:利用L-天冬酰胺时的根部分数和总生物量\n[0087] 根部 标准 标准 标准 标准[0088] N源 分数 偏差 误差 总生物量 偏差 误差[0089] NH4NO3 0,12 0,02 0,01 6,14 1,12 0,42[0090] NO3 0,12 0,01 0,01 4,63 0,98 0,35[0091] 33%Asn 67%\n[0092] NO3 0,17 0,01 0,00 6,23 0,76 0,27