一种重组猪流行性腹泻病毒乳酸乳球菌、其构建方法及应用

发明专利无效专利

申请号：
CN201210557205.0
IPC分类号：C12N1/21;C12N15/40;C12N15/74;C07K16/10;A61K39/42;A61P31/14;C12R1/46
申请日期：
2012-12-20
申请人：
大连大学

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引证文献

著录项信息

专利名称	一种重组猪流行性腹泻病毒乳酸乳球菌、其构建方法及应用
申请号	CN201210557205.0	申请日期	2012-12-20
法律状态	驳回	申报国家	中国
公开/公告日	2013-05-01	公开/公告号	CN103074291A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N1/21 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N1/00 微生物本身，如原生动物；及其组合物（含有由原生动物、细菌或病毒得到的材料的药物的制备入A61K35/66；从藻类材料制备药物的入A61K36/02；从真菌中材料制备药物的入A61K36/06；药用细菌的抗原或抗体组合物的制备，如细菌菌苗入A61K39/00）；繁殖、维持或保藏微生物或其组合物的方法；制备或分离含有一种微生物的组合物的方法；及其培养基〔3，2006.01〕 C12N1/20 细菌；其培养基〔3〕 C12N1/21 引入外来遗传物质修饰的〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;/;2;1;;;C;1;2;N;1;5;/;4;0;;;C;1;2;N;1;5;/;7;4;;;C;0;7;K;1;6;/;1;0;;;A;6;1;K;3;9;/;4;2;;;A;6;1;P;3;1;/;1;4;;;C;1;2;R;1;/;4;6查看分类表>
申请人	大连大学	申请人地址	辽宁省大连市经济技术开发区学府大街10号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	大连大学	当前权利人	大连大学
发明人	高凤山
代理机构	大连东方专利代理有限责任公司	代理人	贾汉生;李馨

摘要

本发明公开一种重组猪流行性腹泻病毒乳酸乳球菌、其构建方法及应用，其制备步骤包括：RT-PCR扩增获得猪流行性腹泻病毒（PEDV）主要保护性抗原COE基因序列，并将其克隆测序。根据测序结果和表达载体特点，设计表达引物，扩增PEDVCOE编码序列，并将其连接至乳酸乳球菌表达载体pNZ8149，电转化入乳酸乳球菌NZ3900细胞内从而获得重组菌。将重组菌以1ng/mL乳链菌肽（Nisin）诱导，通过SDS-PAGE和Westernblot分析，PEDV主要S蛋白获得了表达。表达的重组PEDV乳酸菌载体口服疫苗能够刺激小鼠产生体液免疫和一定的细胞免疫，在制备猪流行性腹泻病毒疫苗等药物中具有广泛的应用前景。

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