固定化细胞色素P450 BM－3的制备方法

发明专利无效专利

申请号：
CN200410053250.8
IPC分类号：--
申请日期：
2004-07-22
申请人：
浙江大学

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专利名称	固定化细胞色素P450 BM－3的制备方法
申请号	CN200410053250.8	申请日期	2004-07-22
法律状态	权利终止	申报国家	中国
公开/公告日	2005-03-23	公开/公告号	CN1597947
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	暂无	IPC分类号	暂无查看分类表>
申请人	浙江大学	申请人地址	浙江省杭州市西湖区天浙大路38号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	浙江大学	当前权利人	浙江大学
发明人	梅乐和;杨建丽;谭培生;姚善泾
代理机构	杭州求是专利事务所有限公司	代理人	张法高

摘要

本发明公开了一种固定化细胞色素P450BM-3的制备方法。步骤如下：1)粗酶液的提取：发酵所得3g湿菌体用5ml缓冲液溶解，悬浮后在冰浴中超声3min，破胞液于4℃，8000r/min离心20min，上清液即为粗酶液，超声功率为200W，超声时间2s，间隙时间5s，工作次数75；2)酶的固定化：取1.2ml比活为39.5U/gPro粗酶液溶于包含有3.6%、4.2%、4.5%、4.7%、5.1%NaCS的10mM、25mM、50mM、75mM，pH75、pH8.0、pH8.2、pH8.5Tris-Hcl缓冲液18.8mL中，混合，用4号针头滴入50ml溶于相同条件缓冲液的6%、6.2%的PDMDAAC中，再继续搅拌40min，然后在pH8.0下用50mMTris-HCl洗涤三次，吸干即可。本发明的优点是：操作简便，条件温和；固定化酶稳定性好；能用于生物反应器，具有工业应用的前景。

序号	公开(公告)号	公开(公告)日	申请日	专利名称	申请人
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