玉米胚乳蛋白体的分离方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201610277276.3
IPC分类号：C07K14/415;C07K1/14
申请日期：
2016-05-01
申请人：
上海大学

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引证文献

著录项信息

专利名称	玉米胚乳蛋白体的分离方法
申请号	CN201610277276.3	申请日期	2016-05-01
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2016-11-09	公开/公告号	CN106084019A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C07K14/415 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C07 有机化学〔2〕 C07K 肽（含有β-内酰胺的肽入C07D；在分子中除了形成本身的肽环外不含有任何其他的肽键的环状二肽，如哌嗪-2，5-二酮入C07D；环肽型麦角生物碱入C07D 519/02；单细胞蛋白质、酶入C12N；获得肽的基因工程方法入C12N 15/00）〔4〕 C07K14/00 具有多于20个氨基酸的肽；促胃液素；生长激素释放抑制因子；促黑激素；其衍生物〔6〕 C07K14/415 来自植物〔6〕	IPC分类号	C;0;7;K;1;4;/;4;1;5;;;C;0;7;K;1;/;1;4查看分类表>
申请人	上海大学	申请人地址	上海市宝山区上大路99号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	上海大学	当前权利人	上海大学
发明人	王桂凤;王佳佳;孙晓亮;韩亮;王刚;宋任涛
代理机构	上海上大专利事务所（普通合伙）	代理人	顾勇华

摘要

本发明涉及一种玉米胚乳蛋白体的分离方法。步骤如下：将授粉20‑25天的新鲜玉米籽粒液氮研磨至粉末，重悬于溶液A(10mMTris‑HClpH8.5,10mMKCl,5mMMgCl2,7.2%sucrose,add1mMDTT,1mMPMSFand罗氏混合蛋白酶抑制剂)，300g离心30分钟去除细胞碎片，上清经2轮粗级不连续蔗糖密度梯度(1.0M/L→1.5M/L→2.0M/L)离心，取1.5M→2.0M蔗糖界面的组分2倍溶液B(10mMTris‑HClpH8.5,10mMKCl)稀释后，经2轮细级不连续蔗糖密度梯度(40%w/w→45%→50%→55%→60%)离心，取50%‑55%之间的组分2倍溶液B稀释后，经30‑60%连续密度梯度离心，收集第14层组分10倍溶液B稀释，13000rpm离心15min去除蔗糖后，得到高纯活性蛋白体。本方法提取纯度极高且保持生物活性，为利用蛋白体生物反应器生产活性物质提供了重要技术手段。

序号	公开(公告)号	公开(公告)日	申请日	专利名称	申请人
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