分泌抗柑橘黄龙病菌单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用

发明专利有效专利

申请号：
CN201910181831.6
IPC分类号：C12N5/20;C07K16/12;G01N33/569;G01N33/577;C12R1/91
申请日期：
2019-03-11
申请人：
浙江大学

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专利名称	分泌抗柑橘黄龙病菌单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用
申请号	CN201910181831.6	申请日期	2019-03-11
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2019-06-18	公开/公告号	CN109897829A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N5/20 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N5/08 （转入C12N 5/071） C12N5/10 经引入外来遗传物质而修饰的细胞，如病毒转化的细胞〔5〕 C12N5/12 融合细胞，如杂交瘤〔5〕 C12N5/16 动物细胞〔5〕 C12N5/18 鼠细胞，如小鼠细胞〔5〕 C12N5/20 融合对象之一是B淋巴细胞〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;5;/;2;0;;;C;0;7;K;1;6;/;1;2;;;G;0;1;N;3;3;/;5;6;9;;;G;0;1;N;3;3;/;5;7;7;;;C;1;2;R;1;/;9;1查看分类表>
申请人	浙江大学	申请人地址	浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	浙江大学	当前权利人	浙江大学
发明人	吴建祥;周雪平;黄德青;何宛芹;王亚琴;吴佳瑜;谢艳
代理机构	杭州求是专利事务所有限公司	代理人	傅朝栋;张法高

摘要

本发明公开了一种分泌抗柑橘黄龙病菌单抗杂交瘤细胞株及其单抗的应用。柑橘黄龙病叶脉粗提液为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能分泌抗柑橘黄龙病菌单抗的杂交瘤细胞株11H9，其保藏号为CGMCCNo.17285。该细胞株分泌单抗腹水间接ELISA效价达10‑7，抗体类型及亚类为IgG1、kappa轻链，该单抗与病叶中56kDa的黄龙病菌蛋白有特异反应，与健康树叶不发生免疫反应。利用11H9单抗建立检测柑橘黄龙病菌的ACP‑ELISA、dot‑ELISA和Tissueblot‑ELISA检测方法，其中ACP‑ELISA和dot‑ELISA方法检测黄龙病叶粗提液的灵敏度分别达到1:20480和1:10240倍稀释(w/v,g/mL)。抗柑橘黄龙病菌单抗的制备及其检测方法的建立为柑橘黄龙病的诊断和检测、流行病学分析、无菌苗木生产及科学防控提供物质和技术支撑。

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