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一种从卵泡液中提取cfDNA的方法

发明专利有效专利
  • 申请号:
    CN201910390311.6
  • IPC分类号:C12N15/10
  • 申请日期:
    2019-05-10
  • 申请人:
    上海交通大学
著录项信息
专利名称一种从卵泡液中提取cfDNA的方法
申请号CN201910390311.6申请日期2019-05-10
法律状态实质审查申报国家中国
公开/公告日2019-08-20公开/公告号CN110144345A
优先权暂无优先权号暂无
主分类号C12N15/10IPC分类号C;1;2;N;1;5;/;1;0查看分类表>
申请人上海交通大学申请人地址
上海市闵行区东川路800号 变更 专利地址、主体等相关变化,请及时变更,防止失效
权利人上海交通大学当前权利人上海交通大学
发明人康亚妮;秦玉兰;毛湛睿;赵晖
代理机构上海旭诚知识产权代理有限公司代理人郑立
摘要
本发明公开了一种从卵泡液中提取cfDNA的方法,通过对卵泡液样本两步离心去除多余细胞碎片;利用裂解液对卵泡液进行裂解,加入的蛋白酶K消化多余的蛋白,同时加入的CarrierRNA使DNA更易析出沉降;利用羧基磁珠对DNA的吸附作用;在高盐低pH的条件下,将卵泡液中的cfDNA吸附到磁珠上,经过盐洗涤和醇洗涤后,去除100bp以下的片段,洗脱后再次加入0.5倍体积的羧基磁珠,吸附并去除大于300bp的长片段,获得合适长度范围的cfDNA。同时对所获的cfDNA进行末端修复,产生平末端连接,并在3’末端添加碱基A,并在cfDNA两端添加接头并扩增纯化等,完成高通量文库的构建,最终完成上机测序。

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