重组人血管内皮细胞生长因子-165蛋白及其生产方法

发明专利无效专利

申请号：
CN201210535955.8
IPC分类号：C12N15/70;C07K19/00;C07K14/475
申请日期：
2012-12-11
申请人：
中国科学院广州生物医药与健康研究院

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专利名称	重组人血管内皮细胞生长因子-165蛋白及其生产方法
申请号	CN201210535955.8	申请日期	2012-12-11
法律状态	驳回	申报国家	中国
公开/公告日	2013-04-17	公开/公告号	CN103045633A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/70 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/63 使用载体引入外来遗传物质；载体；其宿主的使用；表达的调节〔5〕 C12N15/70 专门适用于大肠杆菌的载体或表达系统〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;7;0;;;C;0;7;K;1;9;/;0;0;;;C;0;7;K;1;4;/;4;7;5查看分类表>
申请人	中国科学院广州生物医药与健康研究院	申请人地址	广东省广州市广州科学城开源大道190号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	中国科学院广州生物医药与健康研究院	当前权利人	中国科学院广州生物医药与健康研究院
发明人	吴东海;李洪波;徐爱民;金守光;李娜;李侍武
代理机构	广州华进联合专利商标代理有限公司	代理人	万志香

摘要

本发明公开了一种可溶性重组人血管内皮细胞生长因子-165蛋白及其生产方法，包括以下步骤：克隆hVEGF165基因，得质粒hVEGF165/pMD20-T；构建表达载体pET32及pET28，得重组载体pET32/hVEGF165和pET28/hVEGF165；将重组载体转到宿主中，得转化子；转化子经IPTG诱导得Trx-hVEGF165融合蛋白和hVEGF165重组蛋白，再经镍亲和层析、PBS透析和超滤浓缩纯化；本发明以pET32、pET28为载体、优化诱导表达条件，最终高效表达Trx-hVEGF165融合蛋白和hVEGF165重组蛋白，既保证了两种蛋白的生物学活性，也高效地获得大量稳定蛋白。

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