一种可识别HCVNS5A蛋白的核酸适体、核酸适体的衍生物及其筛选方法和应用

发明专利无效专利

申请号：
CN201210377235.3
IPC分类号：C12N15/115;C12N15/10;C12Q1/70;C12Q1/68;A61K48/00;A61P31/14
申请日期：
2011-06-03
申请人：
湖南大学

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专利名称	一种可识别HCVNS5A蛋白的核酸适体、核酸适体的衍生物及其筛选方法和应用
申请号	CN201210377235.3	申请日期	2011-06-03
法律状态	权利终止	申报国家	中国
公开/公告日	2013-01-09	公开/公告号	CN102864150A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/115 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/115 适体（aptamers），即与靶分子特异性、高亲和力结合，但不与其杂交的核酸〔2010.01〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;1;1;5;;;C;1;2;N;1;5;/;1;0;;;C;1;2;Q;1;/;7;0;;;C;1;2;Q;1;/;6;8;;;A;6;1;K;4;8;/;0;0;;;A;6;1;P;3;1;/;1;4查看分类表>
申请人	湖南大学	申请人地址	湖南省长沙市河西岳麓山湖南大学生物学院变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	湖南大学	当前权利人	湖南大学
发明人	朱海珍;方晓红;刘斌;杨大荣;徐丽;雷少华;刘念礼
代理机构	湖南兆弘专利事务所	代理人	赵洪;杨斌

摘要

本发明公开了一种可识别HCVNS5A蛋白的核酸适体，其为SEQIDNO：5序列所示的DNA片段，其衍生物为包括核苷酸取代后的RNA核酸适体、骨架改造后的衍生物、改造为肽核酸后的衍生物以及连接上放射性分子后的衍生物。该核酸适体的筛选方法包括：先制备带组氨酸标签的丙型肝炎病毒NS5A蛋白，再制备带组氨酸标签的pET200/D/LacZ蛋白；然后对蛋白进行固定，并设计随机核酸文库；最后进行核酸适体的筛选，筛选过程具体又包括DNA文库预处理、反筛、正筛及反复筛选等步骤，最后获得竞争能力强、序列长度得到优化的核酸适体。本发明的核酸适体及其衍生物可用于制备丙型肝炎病毒NS5A蛋白的检测试剂盒或诊断试剂，还可用于制备抑制丙型肝炎病毒在肝细胞内复制的试剂。

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