一种生物素化荧光素酶的表达方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201511021027.X
IPC分类号：C12N9/02;C12N15/70;C12N15/62
申请日期：
2015-12-30
申请人：
北京中科紫鑫科技有限责任公司

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专利名称	一种生物素化荧光素酶的表达方法
申请号	CN201511021027.X	申请日期	2015-12-30
法律状态	授权	申报国家	暂无
公开/公告日	2016-04-06	公开/公告号	CN105462939A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N9/02 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N9/00 酶，如连接酶（6.）；酶原；其组合物（用于清洁牙齿的含酶的制剂入A61K 8/66、A61Q 11/00；含酶或酶原的医药制剂入A61K 38/43；含酶去污剂组合物入C11D）；制备、活化、抑制、分离或纯化酶的方法〔3〕 C12N9/02 氧化还原酶（1.），如萤虫素酶〔3〕	IPC分类号	C;1;2;N;9;/;0;2;;;C;1;2;N;1;5;/;7;0;;;C;1;2;N;1;5;/;6;2查看分类表>
申请人	北京中科紫鑫科技有限责任公司	申请人地址	北京市大兴区经济技术开发区科创六街88号亦庄生物医药园3号楼608 变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	北京中科紫鑫科技有限责任公司	当前权利人	北京中科紫鑫科技有限责任公司
发明人	高静;蔡亦梅;吴超;徐潇;张睿;王者馥;王绪敏;殷金龙;任鲁风
代理机构	暂无	代理人	暂无

摘要

本发明提供一种生物素化荧光素酶的表达方法，其中：使用一种由14个氨基酸残基组成的生物素受体肽GLNDIFEAQKIEWH，将其编码基因与荧光素酶编码基因在大肠杆菌宿主细胞内融合表达，表达的融合蛋白能够在大肠杆菌细胞内被生物素化修饰。与利用BCCP87进行生物素化修饰技术相比，本发明提供的表达方法使得生物素化荧光素酶的产量提高了47％以上；催化活力提高了10倍以上。按照本发明提供的表达方法表达的生物化荧光素酶被磁珠固定后得到的Bead‑LUC在反复洗涤10次和15次后，仍能够维持相较于洗涤前93％以上和90％以上的相对活力。

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