一种表达faeG的基因工程益生菌的构建方法及用途

发明专利无效专利

申请号：
CN201010256198.1
IPC分类号：C12N15/31;C12N15/63;C12N1/21;A61K39/108;A61P1/12;A61P31/04;C12R1/46;C12R1/225
申请日期：
2010-08-17
申请人：
浙江省农业科学院

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著录项信息

专利名称	一种表达faeG的基因工程益生菌的构建方法及用途
申请号	CN201010256198.1	申请日期	2010-08-17
法律状态	撤回	申报国家	中国
公开/公告日	2011-04-27	公开/公告号	CN102031262A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/31 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/31 编码微生物蛋白质，如内毒素的基因〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;3;1;;;C;1;2;N;1;5;/;6;3;;;C;1;2;N;1;/;2;1;;;A;6;1;K;3;9;/;1;0;8;;;A;6;1;P;1;/;1;2;;;A;6;1;P;3;1;/;0;4;;;C;1;2;R;1;/;4;6;;;C;1;2;R;1;/;2;2;5查看分类表>
申请人	浙江省农业科学院	申请人地址	浙江省杭州市石桥路198号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	浙江省农业科学院	当前权利人	浙江省农业科学院
发明人	徐子伟;刘淑杰;李永明;王一成
代理机构	杭州求是专利事务所有限公司	代理人	周烽

摘要

本发明公开了一种表达faeG的基因工程益生菌的构建方法及用途，根据已公开的F4大肠杆菌菌毛粘附素FaeG的基因序列及表达载体质粒特点，设计含特异酶切位点的引物；以产肠毒素性大肠杆菌质粒DNA为模板，进行PCR扩增，获得含有faeG基因的片段，将其与表达载体质粒pNZ8148进行连接，获得重组质粒pNZ8148-faeG，通过电转化方法将该重组质粒转入乳杆菌或乳球菌细胞内，得到表达产肠毒素性大肠杆菌粘附素基因faeG的基因工程益生菌，在乳链菌肽(nisin)的诱导下进行表达，并经SDS-PAGE和Westernblot分析证明目的基因得到正确表达。该重组菌可用于预防哺乳仔猪和断奶仔猪大肠杆菌性腹泻。

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