一种检测三聚氰胺的酶联免疫试剂盒及方法

1.一种检测动物源性食品中三聚氰胺的酶联免疫试剂盒，其特征 是，它含有：
(1)包被三聚氰胺抗原的酶联板或包被抗抗体的酶联板；
(2)酶标记物；
(3)三聚氰胺特异性抗体；
(4)三聚氰胺标准品溶液；
(5)底物显色液；
(6)终止液；
(7)浓缩洗涤液；
(8)浓缩复溶液；
试剂盒中三聚氰胺包被抗原是采用活泼酯法将三聚氰胺半抗原 与牛丙种球蛋白进行偶联得到的，抗抗体为羊抗鼠抗抗体或羊抗兔抗 抗体，羊抗鼠抗抗体是以鼠源抗体为免疫原对无病原体山羊进行免疫 得到，羊抗兔抗抗体是以兔源抗体为免疫原对无病原体山羊进行免疫 得到。
2.如权利要求1所述的检测动物源性食品中三聚氰胺的酶联免疫 试剂盒，其特征是，试剂盒中酶标记物为酶标记抗抗体或酶标记三聚 氰胺抗原，所用酶为过氧化物酶或半乳糖甘酶；酶标记物形式为冻干 粉、浓缩液或工作液。
3.如权利要求2所述的检测动物源性食品中三聚氰胺的酶联免疫 试剂盒，其特征是，所用的酶为过氧化物酶。
4.如权利要求2或3所述的检测动物源性食品中三聚氰胺的酶联 免疫试剂盒，其特征是，试剂盒中酶标记三聚氰胺抗原是采用活性酯 法将标记酶与三聚氰胺半抗原进行偶联得到。
5.如权利要求4所述的检测动物源性食品中三聚氰胺的酶联免疫 试剂盒，其特征是，试剂盒中三聚氰胺特异性抗体为鼠源单克隆抗体 或兔源多克隆抗体，免疫原是采用活泼酯法将三聚氰胺半抗原与钥孔 槭血蓝蛋白进行偶联得到的；抗体形式为冻干粉、浓缩液或工作液； 抗体稀释液为pH值8.2、0.05mol/L、含有3体积％马血清和5体积 ‰明胶的磷酸盐缓冲液。
6.如权利要求5所述的检测动物源性食品中三聚氰胺的酶联免 疫试剂盒，其特征是，试剂盒中当标记酶为过氧化物酶时底物显色液 为过氧化氢、过氧化脲或四甲基联苯胺硫酸盐混合溶液、终止液为 0.1～0.5mol/L的硫酸或盐酸缓冲液；当标记酶为半乳糖甘酶时，底物 显色液为0.5mol/L磷酸钾缓冲液，终止液为2mol/L的柠檬酸缓冲液； 浓缩洗涤液为0.1体积％-0.5体积％吐温80，0.5重量％叠氮化钠防腐 剂或磷酸缓冲液；浓缩复溶液为PBST缓冲液。
7.如权利要求6所述的检测动物源性食品中三聚氰胺的酶联免疫 试剂盒，其特征是，制备酶联板过程中所用的包被缓冲液为pH值9.6、 0.05mol/L的碳酸盐缓冲液；包被三聚氰胺抗原或抗抗体的载体物质 为聚苯乙烯、纤维素、聚丙烯酰胺、聚乙烯、聚丙烯、交联葡聚糖、 玻璃、硅橡胶或琼脂糖凝胶；载体的形式是试管、微量反应板凹孔、 小珠或小圆片；洗涤液为磷酸盐缓冲液；封闭液是含有15体积％～30 体积％的马血清和1体积％惰性蛋白的溶液。
8.如权利要求1-3和5-7任一所述的检测动物源性食品中三聚氰 胺的酶联免疫试剂盒，其特征是，试剂盒中三聚氰胺标准品溶液为六 个浓度梯度的三聚氰胺溶液，三聚氰胺浓缩复溶液为PBST缓冲液， 三聚氰胺标准溶液浓度为：0μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、 500μg/L，1～3ml/瓶。
9.如权利要求4所述的检测动物源性食品中三聚氰胺的酶联免 疫试剂盒，其特征是，试剂盒中三聚氰胺标准品溶液为六个浓度梯度 的三聚氰胺溶液，三聚氰胺浓缩复溶液为PBST缓冲液，三聚氰胺标 准溶液浓度为：0μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L， 1～3ml/瓶。
10.一种检测动物源性食品中三聚氰胺的方法，包括了以下步 骤：
(1)样品前处理；
(2)用权利要求1-9任一项所述的试剂盒进行检测；
(3)分析检测结果。

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