人工合成人肠激酶基因及其表达纯化方法

发明专利有效专利

申请号：
CN201210410156.8
IPC分类号：C12N15/57
申请日期：
2012-10-24
申请人：
山西大学

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著录项信息

专利名称	人工合成人肠激酶基因及其表达纯化方法
申请号	CN201210410156.8	申请日期	2012-10-24
法律状态	授权	申报国家	中国
公开/公告日	2013-02-06	公开/公告号	CN102911955A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12N15/57 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12N 微生物或酶；其组合物（杀生剂、害虫驱避剂或引诱剂，或含有微生物、病毒、微生物真菌、酶、发酵物的植物生长调节剂，或从微生物或动物材料产生或提取制得的物质入A01N63/00；药品入A61K；肥料入C05F）；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基（微生物学的试验介质入C12Q1/00）〔3〕 C12N15/00 突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体（如质粒）或其分离、制备或纯化；所使用的宿主（突变体或遗传工程制备的微生物本身入C12N1/00、C12N5/00、C12N7/00；新的植物入A01H；用组织培养技术再生植物入A01H4/00；新的动物入A01K67/00；含有插入活体细胞的遗传物质以治疗遗传疾病的药剂的应用，基因疗法入A61K48/00，一般肽入C07K）〔3，5，6，2006.01〕 C12N15/09 DNA重组技术〔5〕 C12N15/11 DNA或RNA片段；其修饰形成（不用于重组技术的DNA或RNA入C07H 21/00）〔5〕 C12N15/52 编码酶或酶原的基因〔5〕 C12N15/55 水解酶（3）〔5〕 C12N15/57 作用于肽键上（3.4）〔5〕	IPC分类号	C;1;2;N;1;5;/;5;7查看分类表>
申请人	山西大学	申请人地址	山西省太原市小店区坞城路92号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	山西大学	当前权利人	山西大学
发明人	钮利喜;杨斌盛;石亚伟;李娇;吉雪雪
代理机构	山西五维专利事务所（有限公司）	代理人	杨耀田

摘要

本发明提供了一种能在大肠杆菌中高效表达人肠激酶基因及其产物的表达纯化方法，具体是根据已报道的人肠激酶轻链的核苷酸序列和大肠杆菌偏爱密码子的使用原则，设计编码与人肠激酶轻链氨基酸序列一致的人肠激酶轻链的核苷酸序列，进行体外合成，在大肠杆菌中得到高效表达，并利用亲和纯化得到高活力的MBP-hEKL融合蛋白。该方法适合于人肠激酶的大规模制备。该重组蛋白能特异性识别和切割含有肠激酶切割位点的底物，能够作为工具蛋白酶用于重组融合蛋白融合标签的去除，且适用于生物工程制药业、基因工程、生物化学和分子生物学等方面的研究。

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