石油污染土壤生物修复过程中微生物多样性的PCR-DGGE分析方法

发明专利无效专利

申请号：
CN201010609004.1
IPC分类号：C12Q1/68;C12Q1/04;G01N27/447
申请日期：
2010-12-17
申请人：
北京航空航天大学

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著录项信息

专利名称	石油污染土壤生物修复过程中微生物多样性的PCR-DGGE分析方法
申请号	CN201010609004.1	申请日期	2010-12-17
法律状态	撤回	申报国家	中国
公开/公告日	2011-09-07	公开/公告号	CN102174648A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C12Q1/68 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C0 化学 C12 生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程 C12Q 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（免疫检测入G01N33/53）；其所用的组合物或试纸；这种组合物的制备方法；在微生物学方法或酶学方法中的条件反应控制〔3〕 C12Q1/00 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法（带有条件测量或传感器的测定或试验装置，如菌落计数器入C12M1/34）；其组合物；这种组合物的制备方法〔3，2006.01〕 C12Q1/68 包括核酸〔3，2006.01，2018.01〕	IPC分类号	C;1;2;Q;1;/;6;8;;;C;1;2;Q;1;/;0;4;;;G;0;1;N;2;7;/;4;4;7查看分类表>
申请人	北京航空航天大学	申请人地址	北京市海淀区学院路37号变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	北京航空航天大学	当前权利人	北京航空航天大学
发明人	杨玉楠;郭若勤
代理机构	暂无	代理人	暂无

摘要

本发明属于土壤微生物群落多样性分析技术领域，公开了PCR-DGGE法分析石油污染土壤微生物群落多样性的最佳条件和试剂用量。主要体现在：①取0.4g土样可提取足量的DNA；②取1μL纯化DNA直接用于PCR反应；③取3～5μLPCR产物用于DGGE实验；④制胶时宜用9μLTEMED，40μL10％APS投加到18mL变性丙烯酰胺胶溶液中；⑤灌胶后在顶端用保鲜膜覆盖，隔夜放置，能获得优良的变性胶；⑥设置电压120V，电泳温度60℃，电泳时间5h，可获得良好的DGGE图谱；⑦银染时终止液可不予使用。本发明主要应用于石油污染土壤生物修复过程中分子生态学研究，也可为其他环境样品的分子生态学研究提供参考。

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