一种L-天冬氨酸α-脱羧酶基因突变库的高通量筛选方法

发明专利有效专利

申请号：
CN202010716273.1
IPC分类号：C40B30/08;C12N9/88;G01N21/31;G01N21/80
申请日期：
2020-07-23
申请人：
宁波酶赛生物工程有限公司

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专利名称	一种L-天冬氨酸α-脱羧酶基因突变库的高通量筛选方法
申请号	CN202010716273.1	申请日期	2020-07-23
法律状态	实质审查	申报国家	中国
公开/公告日	2020-10-23	公开/公告号	CN111809247A
优先权	暂无	优先权号	暂无
主分类号	C40B30/08 ? IPC结构图谱： C 化学；冶金 C4 组合技术 C40 组合技术〔8〕 C40B 组合化学；化合物库，如化学库、虚拟库〔8〕 C40B30/00 筛选化合物库的方法〔8〕 C40B30/08 通过测定催化活性〔8〕	IPC分类号	C;4;0;B;3;0;/;0;8;;;C;1;2;N;9;/;8;8;;;G;0;1;N;2;1;/;3;1;;;G;0;1;N;2;1;/;8;0查看分类表>
申请人	宁波酶赛生物工程有限公司	申请人地址	浙江省宁波市鄞州区世纪大道北段333号015幢(7-21)、(7-28)-(7-31)室变更专利地址、主体等相关变化，请及时变更，防止失效
权利人	宁波酶赛生物工程有限公司	当前权利人	宁波酶赛生物工程有限公司
发明人	章兆琪;郑文慧;黄勇开
代理机构	浙江素豪律师事务所	代理人	杨璇

摘要

本发明公开了一种L‑天冬氨酸α‑脱羧酶基因突变库的高通量筛选方法，包括以下步骤：制备L‑天冬氨酸α‑脱羧酶基因突变库孔板；向L‑天冬氨酸α‑脱羧酶基因突变库孔板中加入破碎液，充分震荡，离心，取上清加入到深孔板中，并加入天冬氨酸溶液，摇床反应；取反应后的深孔板，先用乙腈灭活，离心，再取上清液到酶标检测板；然后向所述酶标检测板中加入pH指示剂，并放入酶标仪，在560nm～600nm波长下读取OD值，最后筛选出较高OD值对应的L‑天冬氨酸α‑脱羧酶。该高通量筛选方法操作简便，实施准确，筛选速度快、效率高，而且成本较低；因此，特别适用于筛选出更多高活性的L‑天冬氨酸α‑脱羧酶，因此也有利于酶科学技术的推广应用。

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